РазместитьТатаринова С. С, Неустроев М. П., Тарабукина Н. П.
ГНУ «Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии»
Введение
В современных условиях ведения животноводства в системе мероприятий по увеличению производства животноводческой продукции работа по воспроизводству стада является очень важной. В литературе имеется большое количество работ, посвященных эффективным методам и средствам лечения, но они в основном рассчитаны на местное применение антимикробных препаратов и использование неспецифической патогенетической терапии. Обширная медикаментозная нагрузка на организм может привести к снижению качественных свойств животноводческой продукции [4]. На сегодняшний день поиск препаратов, оказывающих анти- бактериальный, а также иммуномодулирующий эффект остается одним из важнейших направлений в ветеринарной науке и практике [1]. Определенный интерес в этом направлении представляют спорообразующие бактерии рода Bacillus. Из бактерий рода Bacillus наибольший интерес представляют штаммы В. subtilis, которые обладают высокой антагонистической активностью к широкому спектру патогенных и условно-патогенных микроорганизмов [8]. Они отличаются способностью к быстрой колонизации не только в желудочно-кишечном тракте, но и в репродуктивных органах животного (вагины, шейки матки, канала шейки матки), Размножаясь, бактерии выделяют в окружающую среду специфические антибиотики, ферменты, другие биологически активные вещества. Вследствие этого процесса в органах нормализуется микробиоценоз, что приводит к заживлению слизистых оболочек и увеличению фагоцитарной активности крови, нормализации местного иммунитета репродуктивных органов животного, что благоприятно сказывается на функционировании всей половой системы и организма в целом [7].
Целью нашей работы явилось изучение лечебной эффективности применения препарата-пробиотика «Сахабактисубтил» при послеродовых эндометритах у коров.
Материалы и методы
Препарат-пробиотик «Сахабактисубтил» характеризуется широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микро-организмов, а также некоторых патогенных грибов. Кроме того, штаммы и их сочетание обладают комплексом ферментативных активностей: протеолитической, желатиназной, амилазной, целлюлолитической, В-глюконазной и выраженной ксилоназной и фруктозилтрансферазной и интерферониндуцирующей активностью [6].
С целью изучения терапевтической эф-фективности пробиотика «Сахабактисубтил» при лечении послеродовых эндометритов были поставлены производственные опыты в период массового отела с февраля по май в животноводческих хозяйствах Якутии.
Для проведения опыта отобрана 21 корова по принципу аналогов. Диагноз на послеродовой эндометрит ставился с учетом клинических признаков, данных вагинального и ректального исследования животных. При остромгнойно-катаральномэндометрите вводили в матку пробиотик «Сахабактисубтил» с содержанием бактерий Bacillus subtilis — 25 х 109 КОЕ и 50 х 109 КОЕ в 1 мл препарата. Сформированы 3 группы коров (2 опытных и 1 контрольная). Опытным группам коров (п = 7 в каждой) интравагинально вводили 1 раз в день до полного исчезновения сим-птомов болезни «Сахабактисубтил»: в дозах 10 мл (50 х 1 о9 КОЕ) - I опытной группе, 5 мл (25 х Ю9 КОЕ/мл) - II опытной группе.
Для контрольной группы коров (п = 7) применяли схему, принятую в хозяйстве: фу-разолидоновые палочки (интравагинально) 1 раз в день. Уход, содержание, кормление опытных и контрольной групп аналогичные. За животными вели наблюдение. У опытных и контрольных коров исследован вагинальный микробиоценоз в динамике на 1,2, 5-е сутки и 20-й день после лечения. Об эффективности лечения судили по результатам оплодотворения коров, возобновлению полноценного полового цикла, индексу оплодотворения.
При исследовании вагинального микро-биоценоза использованы питательные сре-ды, приготовленные по общепринятому ГОСТу: MRS для лактобактерий, ГМС для учета бифидобактерий, агар Эндо для вы-деления энтеробактерий, среда Байерд-Пар-кера для учета стафилококков, среда для вы-деления псевдомоноса, среда для выделения кишечного иерсиниоза - Иерсиния - агар, скошенный МПА для выделения протея по Щукевичу. Выделение микроскопических грибов проведено методом непосредствен-ного посева в агаризованную среду, в качестве которой использованы среды Сабуро и Чапека. Для спорообразующих бактерий (после прогрева до 80 °С в течение 15 минут) использован МПА. При посеве применен метод разведений. Подсчет выросших колоний проводился в счетчике колоний. Учет результатов посева проведен через 18-24 часа для бактерий, а для грибов до ПО часов.
Родовая и видовая идентификация выделенных микроорганизмов проводилась согласно «Определителю зоопатогенных микроорганизмов» (1995), «Определителю бактерий Берджи» (1997), микроскопиче-ских грибов по «Определителю патогенных и условно патогенных грибов» (2001).
Результаты и обсуждение
К основным причинам послеродовых эндометритов коров относят активизацию патогенной и условно-патогенной микро-флоры, имеющей широкое распространение в окружающей среде, на фоне снижения общей резистентности организма. Применение антибиотиков приводит к возникновению дисбактериоза не только кишечного тракта, но и половых путей [2].
Учитывая, что в матке после отела содер-жится много жидкости, лекарственные препараты перед введением в матку предварительно разводили в рыбьем жире (А. П. Студенцов, 1970).
Как показывают результаты про-веденных опытов (табл. 1), при вве-дении интравагинально пробиоти-ка «Сахабактисубтил» в дозе 10 мл (50 х ю9 КОЕ/мл) в вагинальной микрофлоре увеличивалось содер-жание нормофлоры на пятый день: лактобактерий до 11,0 х Ю4 КОЕ/ мл и бифидобактерий. Количество спорообразующих аэробных бакте-рий повысилось до 1 х 107КОЕ/мл. Условно-патогенные и патогенные микроорганизмы: протей, стафило-кокки, псевдомоносы, токсинообра-зующие грибы - отсутствовали.
Во второй опытной группе, где пробиотик вводили интраваги-нально в дозе 5 мл (25 х 1 о9 КОЕ), в первый день лактобактерий отсут-ствовали, на пятый день количество увеличивалось до 10,0 х Ю4 КОЕ/ мл. Количество энтеробактерий уменьшалось на 5-й день до 5,0 х 102 КОЕ/мл, число бифидобактерий на 5-й день увеличивалось, патогенные стафилококки на 5-й день не вы-являлись, псевдомоносы, иерсинии, протеи отсутствовали. Отмечено присутствие токсигенных грибов. Исходя из результатов исследований вагинальной микрофлоры, считаем, что наиболее эффективно было при-менение пробиотического препарата «Сахабактисубтил» в дозе 10 мл (50 х 109 КОЕ/мл).
На 1, 2, 5-е сутки лечения и на 20-й день после лечения у клини-чески выздоровевших коров кон-трольной группы были взяты смывы из шейки матки для микробиологического исследования. В результате чего выявили дисбактериоз половых органов: угнетение, исчезновение из вагинальной микрофлоры представителей нормального биоценоза, преобладание условно-патогенныхи патогенных микроорганизмов, в том числе иерсиний и токсинообразующих грибов рода Aspergillus, которые определены до видов: A. niger, A.fumigatus, A.flavus, A. nidulans.
При лечении в опытной группе выздоровление происходило на 7-8-е сутки. У животных опытных групп на 2-3-й день усиливались выделения из матки лохий и гнойного экссудата, который на 5-7-й день становился прозрачным, к 10-му дню вы-деления прекращались. В контрольной группе (7 гол.) выздоровление наступило на 12-15-е сутки.
При изучении результатов осеменения коров установлено, что сервис-период в опытных группах коров составлял в среднем 68 дней, индекс оплодотворения - 1,8, а в контрольной группе - 116 дней, индекс оплодотворения - 2,4.
Заключение
Применение препарата «Сахабактисубтил» в дозе 10 мл (50х 109 КОЕ/мл) при послеродовых эндометритах позволяет избежать использования антибиотиков, способствует снижению сроков заболевания, сокращает сервис-период, улучшает физиологическое состояние животных.
Список литературы
1. Волков, М. Ю. Метаболиты Bacillus subtilis какн овые перспективные пробиотические препараты /М. Ю. Волков, Е. И. Ткаченко, Е. И. Воробейчиков, А . В. Синица // Журнал микробиологии. - 2007. -№ 2. - С. 75-80.
2. Григорьева, Г. И. Пробиотики-корректоры микробиоценозов КРС / Г. И. Григорьева, А. А. Арбузова, М. В. Козлова // Практик. - 2003. - № 11-12. -С. 62-66.
3. Напримеров, В. А. Влияние трантимма на микрофлору матки коров при эндометритах : автореферат дисс. / В. А. Напримеров. - Барнаул, 2004. - 19 с.
4. Нежданов, А. Г. Изменение гормонально-метаболического гомеостаза у беременных коров в процессе становления и функционирования фетоплацентарной системы. / А. Г. Нежданов, К. Г. Дашукаева,
А. Г. Бузикова // Мат-лы всерос. науч. и учеб.-метод,к конф. по акушерству, гинекологии и биотехнике размножения животных. - Воронеж, 1994. - С. 105-106.
5. Неустроев, М. П. Штаммы Bacillus subtilis в профилактике послеродовых осложнений коров в условиях Якутии: Методические рекомендации /М. П. Неустроев, Н. П. Тарабукина, С. С. Татаринова//РАСХН. Сиб. отд-ние. ГНУ Якут. НИИСХ - Якутск,2 006.-12 с.
6. Неустроев, М. П. Пробиотики из штаммов бактерий Bacillus subtilis в сельском хозяйстве Якутии /М . П. Неустроев, Н. П. Тарабукина, М. П. Федорова. -Якутск, 2010. - Юс.
8. Похиленко, В. Д. Пробиотики на основе споро-образующих бактерий и их безопасность / В. Д. По-хиленко, В. В. Перелыгин // Химическая и биологиче-ская безопасность. - 2007. - № 2-3. - С. 21-41.
