Н.П. ОВДИЕНКО, А.Х. НАЙМАНОВ, Н.Г. ТОЛСТЕНКО, О.В. ЯКУШЕВА, Г.И. УСТИНОВА, В.А. СИДОРЧУК, М.П. АЛЬБЕРТЯН, B.C. СУВОРОВ

Несмотря на то, что паратуберкулез был впервые описан более чем столетие назад (Н.А. Johne, L. Frotingham, 1895), в настоящее время он остается менее изученным, чем другие хронические болезни. Так, не разгаданы механизмы взаимодействия возбудителя с макроорганизмом, особенности инфекционного и эпизоотического процессов, биологические свойства возбудителя, что связано с исключительными трудностями выделения и культивирования микобактерий паратуберкулеза на искусственных питательных средах, с воспроизводством модельной инфекции как на лабораторных, так и на восприимчивых животных.

По данным Международного эпизоотического бюро, опубликованным на официальном сайте Интернета за 2001 - 2004 гг., паратуберкулез крупного рогатого скота регистрировали в 61 стране всех континентов мира. В нашей стране эта болезнь регистрируется среди крупного рогатого скота и овец, однако имеющиеся данные не отражают фактическое состояние хозяйств по этой инфекции.

Экономический ущерб при паратуберкулезе определяется снижением продуктивности больных животных (мясной, молочной, шерстной), вынужденным убоем клинически больных, а также значительными расходами, связанными с проведением диагностических исследований и ограничительных мероприятий.

Экономические потери от паратуберкулеза более значительны, чем при других инфекциях, так как от клинически больного животного туша бракуется. В США ежегодный экономический ущерб в целом по стране составляет 105 млрд долл. Масштабы потерь в Австралии и Новой Зеландии приближаются к уровню США. Убыток от клинически больной коровы из-за недополучения молока на 19,5 % и снижения в нем жира и белка на 20 % составил 279 фунтов стерлингов (G. Benedictusetal., 1987).

Восприимчивыми животными в естественных условиях являются крупный рогатый скот, верблюды, буйволы, овцы, козы и северные олени. Что касается восприимчивости других видов животных, то требуются дополнительные исследования.

Этиология болезни подвергалась обсуждению долгие годы, так как исследователи придерживались    различных    мнений.     В настоящее время принято считать возбудителем Mvcobacterium avium subsp. paratuberculosis (M. paratuberculosis). Имеется достаточно данных, свидетельствующих об общности протеинов, входящих в химическую структуру возбудителя паратуберкулеза, а также о его аллергенной и антигенной общности с Mvcobacterium avium.

В последние годы обсуждается предположение об общей этиологии паратуберкулеза жвачных и хронических воспалительных заболеваний кишечника других видов животных и человека, о роли возбудителя паратуберкулеза в болезни Крона (Crohn's disease) у человека, проявляющейся хроническим воспалением кишечника. Возбудителя паратуберкулеза обнаруживали в кишечнике у пациентов с хроническими воспалительными поражениями в Италии, США, Великобритании и Чехии. У 50 % людей с болезнью Крона методом ПЦР были идентифицированы микобактерии паратуберкулеза (А.Н. Ghardiani et al., 2004; LA. Sechi et al., 2005 ; R.W. Pickup et al., 2005; W.V. Ayele et al., 2005).

Mvcobacterium avium subsp. paratuberculosis (M. paratuberculosis), кислото-спирто-антиформиноустойчивы, хорошо окрашиваются по методу Циль-Нильсена, длина 0,5 - 1,5 мкм, ширина 0,2 - 0,5 мкм; неподвижны, спор не образуют, растут на элективных питательных средах в аэробных условиях.

Получить культуру возбудителя непосредственно из патологического материала затруднительно. Культуры возбудителя могут быть выделены из фекалий или тканей после обработки их против контаминантов с добавлением к ним фактора роста-микобактина. В мазках из пораженной ткани палочки располагаются в виде палисада, кучек, гнездно. В литературе описаны жесткие (тип R) и мягкие (тип S) колонии паратуберкулезных бактерий.

Во внешней среде паратуберкулезные палочки устойчивы: в навозе и почве они сохраняют жизнеспособность до 11 мес. Солнечный свет убивает их через 10 мес. В молоке, нагретом в закрытых сосудах до 63 °С, палочки погибают в течение 30 мин, при 80 °С -через 1 - 5 мин; 3-5 %-ный фенол убивает их в течение 1 - 5 мин; 5 %-ная эмульсия креолина - за 2 ч; 5%-ный формалин - за 5 - 10 мин.

Основным источником возбудителя паратуберкулеза являются клинически и латентно больные животные. Клинически болезнь чаще наблюдают у коров 3-5- летнего возраста, через 1,5-2 мес после первого или второго отелов.

Бактерии проникают в организм главным образом алиментарным путем, при поедании животными зараженного корма и поении из зараженных непроточных водоемов. Выделение возбудителя из организма зараженных животных происходит в основном с фекалиями, а также с молоком и мочой.

Развитию болезни способствуют различные факторы внешней среды: плохие условия содержания, голодание, неполноценное кормление и скармливание больших количеств кислых кормов (барда, жом, силос), глистная инвазия, минеральная недостаточность, содержание животных на пастбищах с кислыми, бедными солями кальция и фосфора, солончаковыми почвами, переохлаждение или перегревание животных.

Микобактерии паратуберкулеза проникают из желудочно-кишечного тракта через поврежденный эпителий в строму ворсинок тонких кишок и фагоцитируются ретикулярными клетками. При фагоцитозе микобактерии не перевариваются, а происходит их внутриклеточное размножение. В результате этого фагоциты сильно увеличиваются. Пораженные макрофаги объединяются в клеточные скопления и приобретают вид эпителиоидных клеток. Освободившиеся из разрушенных клеток микобактерии вновь фагоцитируются. Возникают крупные скопления микобактерии и пораженных макрофагов вначале в ворсинках, позднее - в глубоких слоях кишечной стенки и в брыжеечных лимфоузлах, вызывая в них атрофию и характерное пролиферативное воспаление. Продуктивная клеточная инфильтрация постепенно усиливается, образуются очаговые или разлитые клеточные скопления, состоящие из гигантских и эпителиоидных клеток. Разрастание грануляционной ткани ведет к утолщению слизистой и подслизистой оболочек, образованию продольных бороздок и складок. Нарушаются ферментативная, секреторная и всасывающая функции кишечника, а также минеральный, солевой и водный обмен. Все это приводит к интоксикации и истощению организма. Иногда возникает бактериемия, при этом возбудитель болезни проникает также в лимфоузлы, паренхиматозные органы, матку, плод и вымя.

Инкубационный период длится от 5 - 10 мес до 5 - 6 лет и более. Различают латентное или бессимптомное течение, когда процесс развивается и протекает скрыто; клиническое, явное или открытое течение, когда процесс обостряется. Клиническое течение болезни, как правило, заканчивается гибелью животного.

У большинства латентно больных животных клинические признаки не проявляются длительное время, животные отстают в росте, теряют упитанность и отличаются небольшой молочной продуктивностью. Отмечают анемию, лейкопению, нейтрофилию со сдвигом ядра влево, уменьшается количество эритроцитов и гемоглобина.

По мере развития болезни резко снижается упитанность при сохранении аппетита, глаза западают в глазных впадинах, возникает диарея, вначале перемежающаяся, а затем все более стойкая и изнуряющая. Вследствие постоянных сильных потуг позвоночник изгибается, мышцы таза атрофируются ("шилозадость"). Фекалии жидкие, зеленовато-желтые или коричневые с пузырьками газа и слизью, иногда с кровью, зловонного запаха. При параличе сфинктера прямой кишки дефекация происходит самопроизвольно, загрязняются хвост, вымя, тазовые конечности. Часто наблюдают отеки в межчелюстном пространстве и в области подгрудка, взъерошенность волосяного покрова. Температура тела у больных животных обычно нормальная, перед смертью бывает ниже нормы.

От начала появления клинических симптомов до смерти проходит 3-4 мес. При значительном обострении болезни смерть может наступить через 3-4 недели.

У овец и коз клинические признаки развиваются медленно, основными из них являются сильное истощение при нормальном аппетите с возможным развитием перемежающейся диареи. При отсутствии диареи фекалии менее плотные и не формируются в шарики. Отмечают подтянутость живота, бледность слизистых оболочек, отеки межчелюстного пространства, подгрудка и живота. При выраженных клинических признаках животное погибает.

Паратуберкулез у верблюдов проявляется профузным поносом, с частой дефекацией, параличом сфинктера ануса, отеками нижней части живота и промежности, истощением, иногда увеличением заглоточных и подчелюстных лимфатических узлов. Температура тела в начале заболевания может повышаться до 40 °С и выше, а потом снижается, иногда доходя до 36,6 °С. Больные животные стонут, часто ложатся.

У северных оленей клинически болезнь начинается с постепенного исхудания в возрасте 1,5 - 2,5 лет. Больные животные подбирают тазовые конечности под живот, позднее у них появляется постоянная или перемежающаяся диарея.

Патологоанатомические изменения чаще обнаруживают в заднем отрезке тонкого отдела кишечника, на илеоцекальной заслонке, в слепой кишке и начальном отрезке ободочной. Они характеризуются утолщением слизистой оболочки пораженных участков кишечника в 5 - 10 раз, а иногда в 20 раз. Вследствие утолщения пораженные отрезки тощей и подвздошной кишок напоминают пищевод или упругую резиновую трубку. При поперечном разрезе просвет кишечника сильно сужен, при продольном разрезе выступает резко выраженная продольная и поперечная складчатость слизистой оболочки, напоминающая извилины мозга или завитки каракуля, которая не расправляется при растягивании. Слизистая оболочка серовато-белого цвета, гребни складок гиперемированы или с полосчато-точечными кровоизлияниями. В тонком отделе кишечника находится небольшое количество мутноватой жидкости, а слизистая оболочка покрыта вязкой, плохо смывающейся слизью желтоватого или кремового цвета. Слизистая оболочка илеоцекальной заслонки набухшая, иногда отечная, темно-вишневого цвета. Лимфатические сосуды брыжейки без жира, утолщены, идут от кишечника к лимфатическим узлам в виде шнуров. Брыжеечные и илеоцекальные лимфатические узлы увеличены, набухшие, упругие, на разрезе влажные. Поверхность разреза мозговидная или серо-желтая, на ней встречаются беловатые очаги, иногда почти вся поверхность имеет беловатый вид. Слизистая оболочка слепой и ободочной кишок также образует поперечные и продольные складки, которые при натягивании расправляются не полностью.

В отличие от крупного рогатого скота у овец утолщение и складчатость слизистой оболочки кишечника отмечают непостоянно. Иногда изменения в кишечнике выражены слабо и проявляются набуханием слизистой оболочки. Брыжеечные лимфатические узлы увеличены, на разрезе сочные, белые или желто-белые. Некоторые лимфатические узлы неравномерно увеличены по всей толщине и приобретают форму груши. При разрезе утолщенной части на поверхности видны светло-серые очаги, а также округлые поражения в виде казеозных, часто обызвествленных очагов. У верблюдов отмечают более тяжелое течение болезни, характеризующееся поражением, кроме кишечника и брыжеечных лимфоузлов, печени и селезенки. Патологоанатомические изменения у других видов животных аналогичны таковым у крупного рогатого скота.

Гистологические изменения при паратуберкулезе отличаются от других энтеритов наличием типичных разростов эпителиоидных клеток, располагающихся диффузно и в виде гранулем. Среди эпителиоидных клеток находятся и гигантские клетки типа Лангганса. Разросты эпителиоидных клеток располагаются в слизистой оболочке кишечника, а иногда и в подслизистом слое. При этом ворсинки слизистой оболочки увеличены, часто сливаются и имеют вид колбообразных вздутий. Некоторые ворсинки сдавлены и атрофированы. В брыжеечных лимфатических узлах эпителиоидные клетки располагаются преимущественно в краевых и центральных синусах, а в лимфатических сосудах - в их стенках (продуктивный эндолимфангит). В срезах, окрашенных по Циль-Нильсену, микобактерии паратуберкулеза находятся в эпителиоидных и гигантских клетках и реже - вне их. Микобактерии паратуберкулеза окрашены в темно-красный цвет. Иногда их бывает так много, что весь срез кажется красным.

Диагноз включает два этапа - выявление клинически больных животных и установление субклинической инфекции. Клинический диагноз требует подтверждения присутствия возбудителя в мазках из фекалий, культур или в ДНК-пробе и ПЦР.

Диагноз на паратуберкулез считается установленным при наличии у животных характерных клинических признаков болезни и получении одновременно положительных результатов бактериоскопического или гистологического исследования биоматериала от этих животных; при обнаружении специфических патологоанатомических изменений в кишечнике и мезентериальных лимфатических узлах животных с гистологическим или бактериоскопическим подтверждением болезни, независимо от наличия или отсутствия клинических признаков заболевания.

Для прижизненного бактериоскопического исследования готовят по 4 - 6 мазков из комочков слизи и обрывков слизистой оболочки кишечника, обнаруживаемых в фекалиях животных, подозрительных по заболеванию. Из участков кишечника и мезентеральных лимфоузлов, имеющих изменения, сходные с паратуберкулезными убитых или павших животных, также готовят по 4 - 6 мазков. Мазки окрашивают по методу Циль-Нильсена. Микобактерии паратуберкулеза в мазках представляют собой мелкие тонкие палочки красного цвета, располагающиеся кучками, частоколами по 3 и более.

Больных паратуберкулезом животных выявляют аллергическим (сухим очищенным ППД-туберкулином для птиц) и серологическим (РСК) исследованиями. Аллергическое исследование животных проводят сухим очищенным (ППД) туберкулином для птиц. Крупный рогатый скот исследуют с 6 мес, овец и коз - с 3 мес, верблюдов - с годовалого возраста. Крупному рогатому скоту ППД-туберкулин для птиц применяют в дозе 2500 ME в 0,2 мл раствора, овцам, козам и верблюдам -в дозе 5000 ME в 0,2 мл раствора. Раствор туберкулина вводят крупному рогатому скоту (кроме быков) внутрикожно в середине шеи, быкам - в подхвостовую складку; овцам и козам - в толщу нижнего века, отступив от его края на 1,5-2 см; верблюдам - в кожу бесшерстного участка брюшной стенки в области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра. Учет и оценку реакции проводят у крупного рогатого скота и верблюдов через 72 ч, у овец и коз - через 48 ч. Реакция проявляется в виде разлитой припухлости тестоватой или мягкой консистенции, сопровождающейся повышением местной температуры и болезненностью воспаленного участка. У отдельных животных реакция выражена в виде плотной, безболезненной, отчетливо очерченной припухлости. При учете реакции у каждого животного прощупывают место введения туберкулина. При обнаружении припухлости измеряют кутиметром толщину кожной складки в месте инъекции и определяют величину ее утолщения в миллиметрах сравнением с толщиной складки неизмененной кожи вблизи от места введения туберкулина. Реагирующими на туберкулин считают животных при образовании отечной болезненной припухлости и при утолщении кожной складки на 6 мм и более. У овец прощупывают место введения туберкулина и сравнивают веки левого и правого глаза. Реагирующими на туберкулин считают животных при образовании ощутимой припухлости в месте введения препарата. Верблюдов считают реагирующими на туберкулин при образовании отечной припухлости и утолщении кожной складки на 7 мм и более.

Серологическую диагностику паратуберкулеза осуществляют у крупного и мелкого рогатого скота с помощью реакции связывания комплемента (РСК). В этой реакции применяют паратуберкулезный антиген СибНИ-ВИ. Реакцию считают положительной при задержке гемолиза в "+++" или "++++", сомнительной в "++", отрицательной при "+" или полном гемолизе эритроцитов. Кровь от животных с сомнительной реакцией исследуют повторно через 2-3 нед. При этом животных неблагополучных по паратуберкулезу хозяйств, с сывороткой крови которых получен дважды сомнительный результат РСК, считают положительно реагирующими, а благополучных - отрицательно.

Паратуберкулез иногда приходится дифференцировать от туберкулезного энтерита, случаев отравления животных молибденом, болезней, вызванных недостатком в рационе меди, алиментарных энтеритов, глистных инвазий,  кокцидиоза.  При исключении алиментарных энтеритов учитывают данные анамнеза и симптоматического лечения. Глистные инвазии и кокцидиоз исключают копрологическим исследованием, туберкулез - прижизненным аллергическим. При туберкулезе кроме кишечника поражаются легкие, другие органы и лимфатические узлы. При недостаточности меди отмечают выпадение волос вокруг глаз и связанность походки вследствие атаксии. Симптомы недостаточности молибдена и меди исчезают после введения в рацион солей указанных элементов.

Эффективных средств лечения больных паратуберкулезом животных не разработано.

Иммунитет при паратуберкулезном энтерите не изучен. Существует предположение о существовании у больных животных инфекционного иммунитета. Используются живые из аттенуированных штаммов и инактивированные вакцины.

Единственная и самая сложная проблема борьбы с паратуберкулезом жвачных - трудности выявления больных с субклинической инфекцией. Для охраны ферм от заноса возбудителя паратуберкулеза предусматривают меры, направленные на недопущение ввоза (ввода) в них животных и фуража из пунктов, неблагополучных по этой болезни. Всех вновь поступающих животных подвергают профилактическому 30-дневному карантинированию.

В экспериментальных и естественных условиях установлено, что телята старше 6 мес не заражаются паратуберкулезом. На этом и основана профилактика болезни, т.е. изолированное выращивание телят. Здоровый молодняк в возрасте 6-12 мес и старше, попавший в инфицированное стадо, не заболевает паратуберкулезом.

При установлении паратуберкулеза хозяйство объявляют неблагополучным и вводят в нем комплекс ограничений, препятствующих распространению инфекции.

После установления диагноза всех животных неблагополучной фермы, стада подвергают клиническому осмотру на паратуберкулез. Животных, имеющих клинические признаки болезни, сдают для убоя на мясо. У остальных старше 18 мес исследуют сыворотку крови в РСК на паратуберкулез. При положительных результатах РСК проводят туберкулиновую пробу. Животных с совпадающими положительными результатами РСК и туберкулиновой пробы признают больными паратуберкулезом и сдают для убоя на мясо. Животных, дающих положительные реакции только по аллергии или РСК, исследуют на паратуберкулез при следующих плановых мероприятиях.

В дальнейшем серологические и аллергические   исследования   на   паратуберкулез всего взрослого поголовья в оздоравливаемом стаде проводят 2 раза в год (весной и осенью). Если в течение последних 12 мес не выявляют больных животных, эти исследования прекращают. Продолжают клинический осмотр поголовья на паратуберкулез, проводят патологоанатомическое вскрытие павших животных и ветеринарно-санитарную экспертизу убойного скота. Животных с клиническими признаками болезни убивают с диагностической целью.

Биоматериал от павших и убитых на мясо животных с изменениями, подозрительными по паратуберкулезу, направляют в лабораторию для гистологического и бактериологического исследования.

Такой порядок ветеринарного контроля за состоянием поголовья сохраняется в течение всего периода до признания хозяйства благополучным по паратуберкулезу.

Молодняк, полученный от больных паратуберкулезом коров, переводят в группу откорма, выращивать его для целей воспроизводства не разрешается.

Телок и бычков, родившихся от здоровых коров оздоравливаемого стада, отделяют от взрослых животных и выпаивают молозивом в течение 5 дней, а затем переводят для выращивания на специально выделенное изолированное помещение за пределами неблагополучной фермы, где им выпаивают молоко от коров благополучной фермы или молоко (обрат) из неблагополучных ферм, обеззараженное при температуре 85 °С в течение 30 мин.

Помещение для телят, расположенное на территории неблагополучной фермы, не считается изолированным.

Молодняк в возрасте от 6 до 18 мес подвергают аллергическому исследованию на паратуберкулез. Реагирующих на туберкулин через 45 - 60 дней исследуют повторно. Животных, повторно реагирующих на туберкулин, сдают для убоя, материал от убитых животных направляют в лабораторию для бактериологического и гистологического исследования на паратуберкулез.

Хозяйство (ферму) признают благополучными по паратуберкулезу крупного рогатого скота через 3 года после последнего случая выявления животного, больного паратуберкулезом, и проведения в полном объеме хозяйственных и санитарных мероприятий.

Оздоровление от паратуберкулеза овец и коз проводят в следующем порядке.

Животных неблагополучного хозяйства (отделения, фермы, отары) после окончания окота подвергают клиническому осмотру. Всех особей, имеющих клинические признаки болезни, вместе с молодняком от них сдают на   убой.   Остальных   животных   хозяйства (отделения, фермы, отары) исследуют аллергически. От реагирующих на туберкулин сыворотку крови исследуют в РСК на паратуберкулез. Животных с положительными результатами аллергического и серологического исследований считают больными и сдают на убой.

Овцематок (коз) и баранов (козлов) исследуют таким же методом повторно через 3-4 мес до начала случной кампании, а баранов (козлов) - также через 2 мес после ее окончания.

Вывоз (вывод) овец, коз из неблагополучных по паратуберкулезу отар для племенных и пользовательных целей не разрешается до полного оздоровления поголовья.

Хозяйство (отделение, ферму, отару) признают благополучными по паратуберкулезу через 3 года после последнего случая выявления больного животного при условии получения в течение этого срока отрицательных результатов бактериологических и гистологических исследований бирматериала от павших, подозрительных по заболеванию и убитых на мясо животных.

Борьбу с паратуберкулезом верблюдов и северных оленей проводят путем выявления и убоя больных животных и проведения комплекса санитарных и организационно-хозяйственных мер, предупреждающих распространение болезни.

Дальнейшие научные исследования по паратуберкулезу должны быть сосредоточены на изучении эпизоотологии, биологии возбудителя, выделенного от различных видов животных, разработку активных и специфических диагностикумов - аллергенов и антигенов, методов стандартизации и проверки эффективности испытуемых диагностикумов, создании лабораторной модели паратуберкулеза, а также средств специфической профилактики болезни. Особенно следует уделить внимание применению современных серологических и молекулярно-генетических методов при диагностике болезни и идентификации возбудителя. Для эффективности культурального метода необходимо продолжить изыскание более чувствительных питательных сред для первичного выделения культур возбудителя и поддержания роста культур. Это позволит разработать более совершенные мероприятия по оздоровлению неблагополучных хозяйств.

Опыт экспериментальных и производственных исследований по применению комплексного метода диагностики и оздоровления хозяйств от паратуберкулеза позволил усовершенствовать систему мероприятий, изложенную в проекте новой инструкции, которая находится на утверждении в Департаменте ветеринарии и животноводства Минсельхоза России.

Журнал "Ветеринария" №12 2007