СВ. ТИМОФЕЕВ
ФГОУ ВПО "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии имени К. И. Скрябина'

Ф.В. ШАКИРОВА
ФГОУ ВПО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины»

Одним из методов, используемых для оценки процесса заживления тканей, является морфологический. Он применяется для определения давности травмы, строится на изучении локальных реактивных изменений на месте повреждения, в том числе и пролиферативных реакций.

Цель работы - морфологически доказать преимущество чрескостного способа фиксации костных отломков.

Материалы и методы. Гистологические исследования костной гкани выполняли на различных этапах эксперимента: через 10. 30. 45 суток после интрамедуллярного остеосинтеза и фиксации аппаратом чрескостной фиксации. Была изучена морфодинамика воспалительного процесса в мягких тканях на сроках: 3 часа. 6 ч.. 12 ч.. 1. 3, 6 суток после операции по двум моделям (при интрамедуллярном остеосинтезе и чрескостном остеосинтезе стержневым аппаратом фиксации).

Для приготовления гистологических препаратов костной ткани проводили биопсию участка костной с прилегающими мягкими тканями. После выделения препарата максимально удаляли мягкие ткани и помещали его на 7-10 суток в 10%-ный раствор нейтрального формалина. После этого препараты тщательно промывали холодной проточной водой 6-8 часов, а затем распиливали их в сегментальной плоскости. После фиксации в формалине препараты обезжиривали в ацетоне в течение 4-х суток, каждые двое суток меняя раствор ацетона. После обезжиривания препараты снова промывали и де кальцин провал и в 8- 10%-ном растворе азотной кислоты. После декальцинирования препаратов проводили их подрезку. Далее препараты нейтрализовали в 5%-ных квасцах и помещали в спирты возрастающей концентрации (до абсолютного спирта), после чего заливали в целлоидины (3%, 6%, 8%, 10%-ные растворы) в течение 4-х месяцев. Из приготовленных таким образом препаратов выполняли срезы с помощью санного микротома МС-2.

Из анатомических препаратов выполняли срезы в горионтальной плоскости. Полученные срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Исследования и микрофотосъемку подготовленного материала проводили на микроскопе Leica DMLS. фотографическая насадка Leica 60.

Результаты исследований. При гистологическом исследовании костных препаратов оценивалась структура межклеточного вещества, его строение, количество.

Постоянная перестройка костной ткани, чередование костеобразующих и костеразрушающих процессов оставляют следы в межуточном ее веществе а виде линий склеивания, линий цементирования. Они ограничивают новообразованную кость и отделяют ее от фрагментов старых костных структур.

При оценке динамики костеобразования обращалось внимание на появление и "исчезновение" остеоида - необызвествленного костного матрикса - появление аморфного белкового вещества. Кроме того, при изучении гистопрепаратов оценивалось отношение костных структур к костному мазку. В норме они отделены друг от друга. К патологии относится полное или частичное вытеснение костного мозга избыточно образующейся костной субстанцией.

При чтении гистологических препаратов костной ткани обращалось внимание на состояние двух слоев надкостницы. Наружный слой состоит из пучков коллагеновых волокон, эластических структур, кровеносных сосудов и их сплетений. Внутренний слой богат камбиальными малодифференцированными клеточными элементами, способными образовывать кость. При раздражении (в данном случае перелом) камбиальные клетки быстро реагируют, они пролиферируют. округляются, увеличиваются в размере. Количество рядов этих клеток также прибавляется, они приподнимают наружный слой надкостницы. По мере созревания эти клетки приобретают строение остеобластов, способных формировать костные структуры. Отел еже на динамика формирования костной мозоли при двух моделях опыта.

В первый этап после травмы в области перелома отмечается разрушение ткани: костных балок, костного мозга и т.д. Между отломками возникают разной интенсивности кровоизлияния, которые пронизывают костный мозг, надкостницу и прилежащие мягкие ткани. Надкостница отслаивалась (при обеих моделях), главным образом, за счет смещения отломков. Таким механизмом образовалась зона разрушения. При сравнительном анализе двух моделей оказалось, что первая (интрамедуллярный остеосинтез) более травматична, возникло обилие не только крупных отломков, но и мелких (последние сильно нарушают архитектонику всех структурных компонентов).

При кровоизлиянии эритроциты распадаются, выпадает фибрин, формируя кровяной сгусток. Он является первым, скрепляющим отломки материалом. Это так называемый «первичный клей», восстанавливает целостность поврежденной кости, Фибрин выпадает в аморфном виде, что имеет особое значение в репаративном процессе, т.к. в него легко проникают клеточные элементы, из которых затем формируется мозоль. Кроме того, фибрин при открытых переломах является -пробкой», препятствующей проникновению нагноительного процесса в глубокие отделы кости и костномозгового канала. По линии перелома повреждаются кость, надкостница, костный мозг, прилежащие мягкие ткани, нервные волокна, кровеносные сосуды.

При первой модели больше отломков разной величины с разрывом наибольшего количества сосудов, что увеличивает размеры кровоизлияний, которые отслоили надкостницу в краевых отделах отломков. Нарушается волокнистая часть надкостницы, более интенсивно реагируют сосуды микроциркуляторного русла (длительный спазм артерий, их малокровие, дистония - парез венул, капилляров). Последнее, в конечном итоге, усиливает трофические, удлиняет сроки репаративных процессов.

Внутренний остеогенный слой надкостницы быстро реагирует на травму. Клетки округляются, увеличиваются в размере, пролиферация клеток сопровождается утолщением надкостницы за счет увеличения количества рядов этих клеток. Начиная с 4-5 суток, формируются тонкостенные сосуды синусного типа, их появление предшествует костеобразовательному процессу.

В наружном ряду остеогенной части надкостницы располагаются менее зрелые клетки. По мере приближения к кости их цитоплазма приобретает базофильное окрашивание за счет увеличения эндоплазматического ретикулума и аппарата Гольджи, которые синтезируют белок. Таким образом, эти клетки приобретают строение остеобластов, которые способны формировать костные структуры.

При 2-й модели (фиксация стержневым аппаратом) участки кости испытывают сжатие, по биомеханике становятся электроотрицательными, подвергаются резорбции. При второй модели имеет место сочетание остеокластического и пазушного рассасывания с преобладанием пазушного, В связи с этим архитектоника восстанавливается быстрее, формирование незрелой грубоволокнистой кости происходит практически бесследно по остеогистоархитектонике.

Производили алгоритмизированное изъятие и исследование мягких тканей в области диафиза большеберцовой кости у собак. В нашем случае производилось локальное изъятие кожи, подкожной клетчатки, мышц.

При исследовании мягких тканей получены следующие результаты. Через 3 часа после операции наблюдалось интенсивное нарушение микрогемодинамики (воспалительная инфильтрация стромы, лейкостаз, полнокровие сосудов). Через 6 часов - цитоз всей толщи мягких тканей (дистрофия мышечных волокон, распространенная лейкоцитарная инфильтрация) Через 12 часов - очагово-распространенная лейкоцитарная инфильтрация. На 3 сутки после операции при 1-й модели (интрамедуллярный остеосинтез) преобладают процессы альтерации, при 2-й модели (фиксация стержневым аппаратом) - пролиферативные изменения (присутствие лимфоцитов, фибробластов). Через 6 суток фиксировалось развитие грануляционной ткани. При 2-й модели -менее интенсивная экссудация, размеры грануляционной ткани меньше при высокой функциональной активности.

Заключение. Если кровоснабжение зоны перелома будет нарушено, то остеогенные клетки попадают в неблагоприятные для них условия обмена, характеризующиеся гипоксией. Клетки, приспосабливающиеся к таким условиям тканевой среды, образуют большое число хондроидных клеток. Образуются напластования слабоминерализованных тканей в зоне перелома без признаков ангиогенной костной структуры.

Журнал "Ветринарная медицина" №2-3 2008