Нечаева Т. А.

ГБУ Республики Карелия «Республиканская ветеринарная лаборатория»

Введение

В современных индустриальных рыбоводных хозяйствах разных типов все больше возрастает потребность в препаратах, содержащих витамины, аминокислоты и микроэлементы, необходимые для нормального роста и развития рыб. В условиях, когда применение антибиотиков все более ограничено в связи с особенностями технологического цикла выращивания, а также с высокой резистентностью, которую проявляют к ним болезнетворные микроорганизмы, использование витаминно-аминокислотных комплексов становится все более актуальным. Их применение позволяет усилить иммунитет рыб при сезонных вспышках бактериальных заболеваний, ухудшении качества воды и других стрессовых ситуациях, неизбежных в современном рыбоводстве.

Одной из важнейших групп витаминов, необходимых для нормальной жизнедеятельности рыб, являются витамины группы В. Они входят в состав основных ферментов, катализирующих различные реакции белкового, жирового и углеводного обмена. Будучи водорастворимыми, витамины группы В, в отличие от жирорастворимых, не накапливаются в больших количествах в организме и должны постоянно поступать с пищей. Витамины группы В принимают участие в пластическом и энергетическом обмене, поэтому их дефицит вызывает снижение скорости роста и эффективности усвоения корма, а часто и повышенную смертность, особенно у молоди.

Недостаток витамина В2 (рибофлавин) приводит к нарушению координации движений, потере аппетита и, как следствие, к снижению темпа роста. Очень характерным признаком при авитаминозе по витамину В2 является поражение глаз у рыб: кровоизлияния и помутнение зрачка.

Витамин В6 (пантотеновая кислота) играет ведущую роль в осморегуляции с под-держанием гидроминерального гомеостаза в жабрах и почках. При дефиците витамина В6 возможны отеки жаберного эпителия и слипание жабр.

Витамин В4 (холин) и витамин В8 (инозитол)   оказывают  липотропное   действие, способствуя выведению лишних жиров из печени и предотвращают ее жировую дегенерацию. Поэтому их дефицит приводит к избыточному накоплению липидов в печени, что неоднократно отмечалось при выращивании радужной форели в искусственных условиях. Потребность в этих витаминах возрастает при повышенном содержании жира в корме, что характерно для кормов лососевых рыб.

Недостаток витамина В7 (биотин) приводит к дегенерации жаберного эпителия, избыточному ослизнению покровов тела, анемии печени, нарушению синтеза жирных кислот и гликогена и т. д.

При дефиците витамина В12 (цианкоболо-мин) наблюдают анемию, снижение содержания общего белка в крови, низкий гемоглобин [6]. В большом количестве отмечают также появление мелких незрелых эритроцитов, что в то же время свидетельствует о токсическом влиянии на организм [3].

Предполагается, что в современных искусственных кормах потребности рыб в необходимых витаминах удовлетворены за счет использования для их изготовления высококачественного сырья и витаминных премиксов [6]. Однако в процессе перевоз-ки и хранения витамины могут разрушаться, в то время как у рыб в стрессовой ситуации или при заболевании потребность в тех или иных витаминах возрастает. Поэтому периодически на рыбоводных предприятиях возникает необходимость во введении в корм витаминов и витаминно-аминокислотных комплексов.

Препарат Гемобаланс содержит витамины группы В в количествах, приемлемых для лососевых рыб, поэтому может быть использован улучшения состояния рыб при стрессе, токсикозе и т. д.

Гемобаланс является источником необхо-димых для рыб биогенных микроэлементов, например кобальта. Этот биогенный элемент в пресных водоемах северо-запада России вообще не обнаружен либо найден в минимальных количествах. Между тем введение кобальта в корм повышает уровень гемоглобина и эритроцитов в крови рыб, стимулирует их рост. Форель проявляет большую устойчивость к высоким температурам воды, что особенно важно в озерных садковых хозяйствах [6].

Целью нашей работы было изучение эффективности применения препарата Гемобаланс в форелеводстве при разных методах индустриального выращивания и у рыб разных возрастов.

Материал и методы

Исследовательская работа была проведена на базе ФГУП Федеральный селекционно-генетический центр рыбоводства (ФГУП ФСГЦР), Ленинградская область.

Сеголетки радужной форели, содержащиеся в модуле установки с замкнутым циклом водоснабжения (УЗВ) и двухлетки радужной форели, размещенные в бетонных бассейнах с водоснабжением из поверхностного водоема, регулярно подвергалась ихтиопатологи-ческому обследованию.

Температура воды за период наблюдения составляла 10-18 °С в бассейнах и 11-16 °С в УЗВ.

Ихтиопатологическое обследование проводили по методике Быховской-Павловской [1]. Бактериологические исследования были проведены специалистами Межобластной вете-ринарной лаборатории (г. Санкт-Петербург). Диагностирование флавобактериоза в полевых условиях проводили по экспресс-методу Люмсден [8]. О физиологическом состоянии рыбы судили по уровню общего белка в крови и по состоянию форменных элементов крови (окраска мазков крови произведена по мето-ду Романовского). Определение содержания общего белка в сыворотке крови проводили с помощью рефрактометра. Гидрохимические исследования воды проведены в лаборатории экологической токсикологии ГосНИОРХ (г. Санкт-Петербург).

Для проведения эксперимента были взяты две группы радужной форели разного возраста, содержавшиеся в разных условиях.

Сеголетки радужной форели содержались в бассейнах модуля УЗВ. В середине июля у них были отмечены клинические признаки токсикоза и бактериальной инфекции, наиболее распространенной в форелевых хозяйствах - флавобактериоза (миксобактериоза).

 В то же время было зафиксировано повышение смертности рыб. Среди сеголеток радужной форели были выделены подопыт-ная и контрольная группы. Навеска в обеих группах составила 9,3 г. Количество рыб в опыте - 28 200 экз., в контроле - 28 386 экз.

В контрольной группе проведено кормление по стандартной схеме - витамин С в дозировке 1,5 г/кг корма в течение 10 дней.

В подопытной группе в корм введен Гемобаланс в дозировке 1 мл/кг корма и витамин С в дозировке 1,5 г/кг корма в течение 10 дней.

Двухлетки радужной форели содержались в бетонных бассейнах, куда вода поступала из головного пруда. В начале осени сильные дожди способствовали значительному загрязнению воды, поступающей в бассейны. В течение трех дней вода имела ярко выра-женный коричневый оттенок за счет смыва большого количества органических веществ и взвесей. На поверхности воды отмечали наличие маслянистой пленки.

В этот период рыбы были не активны и плохо питались. Вскоре было отмечено по-вышение смертности среди двухлеток фо-рели. Среди них были выделены подопытная и контрольная группы, содержавшиеся в отдельных бетонных бассейнах. Навеска рыб в обоих группах была примерно одина-ковой: 240-250 г. Ихтиомасса в контроле и опыте составляла 300 кг на бассейн, коли-чество рыб в опыте -1 250 экз., в контроле -1 200 экз.

В контрольной группе проведено кормление по стандартной схеме - витамин С в дозировке 1,5 г/кг корма в течение 10 дней.

В подопытной группе в корм введен Ге-мобаланс в дозировке 1 мл/кг корма и вита-мин С в дозировке 1,5 г/кг корма в течение 10 дней.

Результаты исследования

Сеголетки форели

В начале эксперимента у рыб контрольной и подопытной групп наблюдали признаки как токсикоза, так и флавобактериоза. При выращивании рыбы в УЗВ риск бактериальных заболеваний и токсикозов значительно увеличивается [2].

 О токсическом воздействии свидетельствовали ослизненные и отекшие жабры. У отдельных особей наблюдали нарушение координации движений, оттопыренные жаберные крышки, учащенное дыхание. Содержание кислорода в воде составляло 12 мг/л, что соответствует нормативному при выращивании форели. Гидрохимические исследования воды выявили высокое содержание нитритов - 0,43-0,47 MrN/л (норматив -0,02 MrN/л) и нитратов - 0,10-0,12 мгР/л (норматив - 0,02 мгР/л). В этот период уровень рН был повышен до 8,1-8,5, что в системах УЗВ способствует резкому возрастанию токсичности свободного аммония.

Гематологические исследования обнаружили изменения клинической картины крови, характерные для токсикоза. В мазках крови у сеголеток форели было отмечено большое количество незрелых безъядерных и разрушенных эритроцитов. В разной степени признаки токсикоза встречали у 5-10 % обследованных рыб. Токсическое воздействие вызывает нарушение эритропоэза, вследствие чего происходит нарушение дыхательных процессов в организме рыб, развивается гипоксия.

Кроме того, у сеголеток форели наблюдали также клинические признаки одной из форм флавобактериоза - бактериального холодноводного заболевания. У 10 % обследованных рыб обнаруживали анемию жабр, печени и почек, увеличение селезенки. Некротическое поражение плавниковых лучей отмечали единично. Микробиологи-ческие исследования выявили возбудитель бактериального холодноводного заболева-ния - Flavobacterium psychrophilum.

Необходимо отметить, что при попада-нии в установку с рециркулируемой водой рыбы, обсемененной условно-патогенными микроорганизмами, уровень накопления болезнетворного агента быстро возрастает и включается механизм его передачи здоро-вым особям. В условиях тесного контакта, неизбежного при выращивании рыб в УЗВ, скорость передачи потенциального возбудителя очень высока [4].

Основной причиной ухудшения эпизо-отического   состояния   сеголеток   форели,

 по нашему мнению, послужил токсикоз, а затем на его фоне произошло развитие бактериальной инфекции. При выращивании в УЗВ патологические процессы у рыб часто развиваются подобным образом [7].

В конце июня отход в опыте и в контроле достигал 0,8-1 % от общей численности рыб. После принятия мер по улучшению работы УЗВ и проведения лечебно-профилактического курса гибель рыб в опыте снизилась 0,2 % в сутки, а в контроле - до 0,3 % (рис. 1).

Исследования крови, проведенные в дан-ный момент, позволяют говорить о норма-лизации состояния форменных элементов красной крови и нормальном течении эри-тропоэза. Восстановительные процессы бо-лее активно протекали у рыб в подопытной группе. У рыб в контроле обнаруживали большее (до 15 %) число незрелых безъядер-ных эритроцитов.

Клинические признаки миксобактериоза отмечали единично, в то время как призна-ки токсикоза по-прежнему наблюдали у 10 % рыб. Только снижение температуры воды до 11-12 °С и снижение уровня рН до 7,7-7,8 позволили нормализовать состояние рыб.

Двухлетки форели

В начале опыта у рыб контрольной и подопытной групп отмечали повышенное ослизнение жабр и поверхности тела, что, по всей вероятности, являлось следствием органического загрязнения воды. В тоже время у 30-40 % двухлеток наблюдали в разной степени некротическое поражение плавников и увеличение селезенки, что позволяет говорить о хроническом проявлении бактериальной инфекции. Содержание общего белка в крови у таких рыб составляло 2,75±0,5 г%. Снижение содержания общего белка в крови ниже 3 г% свидетельствует об ухудшении физиологического состояния рыбы, что может быть вызвано инфекционной болезнью [5].

У рыб, состояние внутренних органов которых визуально соответствовало норме, содержание общего белка было 3,46±0,7 г%, что для рыб такого возраста соответствует нижнему пределу нормы. Гибель рыб в контроле перед началом эксперимента составила 1,8 % от общей численности рыб, а в опыте - 5,5 %. Отход рыб в опыте изначально был в три раза выше, чем контроле, что свидетельствует об ухудшении их состояния по сравнению с особями контрольной группы.

После проведения курса лечебного кормления отход во второй декаде сентября снизился в подопытной группе до 0,7 %, а в контрольной - до 1,3 % (рис. 2) Состояние жабр, плавников и поверхности тела соответствуют норме у подавляющего большинства рыб в опыте и в контроле.

Признаки хронической бактериальной инфекции продолжали выявляться у отдельных рыб. Содержание общего белка в крови у таких особей составляет 3,10±0,6 г%. У рыб, состояние которых соответствует норме, содержание общего белка в крови составляет 3,97±0,6 в контроле и 4,15±0,5 в опыте. Гибель рыб полностью прекратилась во второй половине сентября.

Результат воздействия препарата - снижение смертности рыб в опыте по сравнению с контролем - представлен в таблице 1.

Таблица 1. Воздействие препарата Гемобаланс на снижение смертности радужной форели

Обсуждение результатов

Сеголетки форели

В ходе эксперимента наблюдали улучшение состояния рыб в контрольной и в подопытной группах. Разница в снижении гибели рыб в процентном соотношении к их общей численности минимальна (до 0,2 % в опыте и до 0,3 % в контроле). Нормализация работы УЗВ явилась главным фактором, способствовавшим оздоровлению сеголеток форели.

В то же время исследования крови позволяют предположить, что процесс восстановления нормального состояния форменных элементов красной крови и нормализации эритропоэза осуществляется активнее при введении в терапевтическую схему препарата Гемобаланс.

Так как появление большого количества мелких незрелых эритроцитов отмечено как при токсикозе, так и при дефиците витамина В12, можно предположить, что при токсическом воздействии на организм рыб потребность в этом витамине и вообще в витаминах группы В возрастает. Поэтому введение состав лечебного корма препарата Гемобаланс способствует более активному восстановлению нормального кроветворения и всего организма.

Двухлетки форели

Перед началом эксперимента выявлено значительно худшее состояние у двухлеток контрольной группы, что выразилось, в большем, чем подопытных рыб, отходе. В дальнейшем наблюдали улучшение со-стояния рыб в обеих группах. Однако надо отметить, что восстановление нормального физиологического состояния (содержание общего белка в крови, снижение гибели рыб) более активно происходило в опыте, чем в контроле. По окончании лечебно-профилактического курса кормления отход форели в подопытной группе был значительно ниже, чем в контроле - в 2,5 раза. Обращает на себя внимание и более высокое содержание общего белка в сыворотке крови подопытных рыб, соответствующее нормативному для рыб такого возраста и размера.

Необходимо отметить, что характерными признаками недостатка витамина В12 у рыб являются анемия и снижение содержания общего белка в крови [6]. Здесь также можно предположить, что под влиянием токсического воздействия, осложняемого наличием хронической бактериальной инфекции, у рыб возрастает потребность в витаминах, в том числе и витаминах группы В. Таким образом, введение в терапевтическую схему препарата Гемобаланс способствует более быстрому восстановлению функций организма, и, соответственно, более высокой вы-живаемости форели.

Заключение

Проведенные нами исследования по оценке эффективности применения препарата Гемобаланс у сеголеток и двухлеток радужной форели при различных методах индустриального выращивания позволяют сделать следующие выводы.

1. Гемобаланс может быть рекомендован для введения в корм молоди форели, особенно при содержании ее в УЗВ. Можно предложить введение Гемобаланса как с лечебной, так и с профилактической целью в дозировке 1 мл/кг корма, длительность курса 10 дней.

2. Гемобаланс можно использовать для активизации восстановления организма после токсикоза и при наличии хронической бактериальной  инфекции у рыб  старших возрастов.  Предлагаемая дозировка Гемобаланса - 1 мл/кг корма при длительности курса 10 дней.

3. Наиболее оптимально применение Гемобаланса совместно с витамином С. Эффект от воздействия такой терапевтической схемы лечения значительно усиливается по сравнению с использованием для лечебно-профилактического кормления рыб только витамина С.

Список литературы

1. Быховская-Павловская, И. Е. Паразитологическое исследование рыб / М.-Л.: АН СССР. - 1952. - 63 с.

2. Васюков, И. И. Изучение микрофлоры форели в замкнутых системах / И. И. Васюков, Е. В. Авдеева //Биологические основы индустриальной аквакультуры : сб. науч. трудов КТИ. - Калининград. - 1984. - С. 54-59.

3. Житенева, Л. Д. Основы ихтиогематологии (в сравнительном аспекте) / Л. Д. Житенева, Э. В. Макаров, О. А. Рудницкая. — Ростов-на-Дону, 2004. - 311 с.

 4. Котлярчук, М. Ю. Зараженность карпа бактериями рода Aeromonas в установке с замкнутым циклом водообеспечения Калининградского морского рыбного порта и оценка их патогенности / М. Ю. Котлярчук // Гидробиология на рубеже веков и тысячелетий : сб. науч. трудов КГТУ. - Калининград. - 2001. - С. 182-187.

5. Лысанов, А. В. Взаимосвязь некоторых систем организма и их влияние на развитие заболеваний карпа при выращивании на теплых водах / А. В. Лысанов // Сборник  научных  трудов   ГосНИОРХ.   -  СПб.   - 311 в.-1992.-С. 94-98.

6. Остроумова, М. В. Биохимия и основы питания рыб / М. В. Остроумова. - СПб., 2001. - 357 с.

7. Токсикозы рыб с основами патологии. Справочная книга ; составители Н. М. Аршаница, М. А. Перевозников. - СПб. - 2006. - 179 с.

8. Lumsden, J. S. Necrotic miositis in cage cultured rainbow    trout    (Oncorhynchus    mykiss    Walbaum), caused by Flexibacter psychrophilus / J. S. Lumsden, V. E. Ostland, H. W. Ferguson // J. Fish Diseases. - 1996.-Vol. 19.-№2. -P. 113-119.