Мифтахутдинов А. В.
Аннотация. Электрокардиографические исследования цыплят без использования средств для наркоза обладают малой информативностью вследствие большой вариабельности показателей, поглощением или отсутствием зубцов и интервалов Р, Q, Т. В процессе исследования цыплят с разной стрессовой чувствительностью обнаружены статистически значимые отличия в показателе ЧСС, которые в состоянии относительного покоя выше у стресс-чувствительных цыплят.
Введение
Электрокардиография является ценным диагностическим методом, применяемым для регистрации и исследования электрических полей, образующихся при работе сердца. Электрокардиограмма позволяет получать сведения о физиологическом состоянии в норме и патологии. Однако несмотря на высокую диагностическую ценность, электрокардиография не нашла широкого применения при изучении физиологических особенностей птиц. Возможно, это связано со сложностью интерпретации данных, полученных при электрокардиографии. С появлением современных электронных электрокардиографов и программных средств анализа полученных данных расширяются возможности использования электрокардиографии, в том числе и в птицеводстве.
Целью наших исследований явилось изучение электрокардиографии как метода, позволяющего изучать физиологические особенности кур с разной стрессовой чувствительностью в покое, а также под действием внутрикожного введения 70 % раствора скипидара, вызывающего развитие неспецифических адаптационных реакций в организме.
Материалы и методы
Для проведения эксперимента нами были сформированы 2 группы цыплят-бройлеров - петушков с известной стрессовой чувствительностью по 5 голов в каждой с одинаковой живой массой, кросса ISA F15. Первая группа состояла из стресс-чувствительных цыплят, вторая - из стресс-устойчивых. Оценку стрессовой чувствительности проводили скипидарным методом в собственной модификации. Электрокардиографию проводили с помощью электронного электрокардиографа для ветеринарии «Поли-Спектр 8/В». Запись и анализ электрокардиограмм проводили с помощью программного комплекса «Поли-Спектр-Экспресс», дополнительно анализ электрокардиограмм проводили вручную. На первом этапе эксперимента проводили анализ электрокардиограмм у цыплят с разной стрессовой чувствительностью в состоянии относительного покоя.
На втором этапе эксперимента для активации неспецифических адаптационных реакций организма цыплят проводили моделирование стадии ориентировки стресса путем внутрикожного введения 70 % раствора скипидара и в период 30-60 минут после пробы проводили электрокардиографические исследования цыплят.
В процессе эксперимента проводили анализ общего состояния цыплят и электрокардиографические исследования по методике, описанной Sturkie P. D. (1949) [8]. Для этого электроды типа «крокодил» накладывали на кожу правого и левого крыла и правой и левой конечности, для наилучшего контакта использовали электропроводный гель для электрокардиографии. Цыплята закреплялись под углом 45 градусов на специальном столике с приспособлениями для фиксации птиц, разработанном на кафедре физиологии и фармакологии Уральской государственной академии ветеринарной медицины.
Электрокардиограммы записывались через несколько минут после того, как птицы успокоятся. Запись электрокардиограммы осуществляли в течение 10 секунд по 6 стандартным отведениям - I, II, III, aVL, aVR и aVF. Для расчета использовали II отведение. Для анализа использовали усредненный комплекс QRS, в котором регистрировали стандартные интервалы и амплитуды.
Статистическую обработку полученных данных осуществляли с помощью программы Statistica 6.1 с использованием методов непараметрической статистики. Для анализа статистической разницы между межгрупповыми признаками использовали U-критерий Манна-Уитни. Для анализа показателей цыплят с одинаковой стрессовой чувствительностью в разных физиологических состояниях использовали критерий Вилкоксона. Данные в таблицах представлены в абсолютном выражении и в виде медиан и квартилей Me(Ql-Q3).
Результаты исследований и обсуждение полученных данных
Результаты оценки электрокардиограмм цыплят в состоянии относительного покоя представлены в таблице 1. Анализируя эти данные, необходимо, прежде всего, отметить, что наблюдаемая средняя электрическая ось
Таблица 1. Интервалы ЭКГ цыплят в состоянии относительного покоя (II отведение)
Показатель |
чес, уд./мин. |
R-R макс, мс |
R-R мин., мс |
R-R ср., мс |
Р, мс |
P-R (P-Q), мс |
QRS, мс |
QT, мс |
Ось QRS, О |
Стресс-чувствительныецыплята |
|||||||||
1 |
424 |
280 |
96 |
141 |
- |
- |
90 |
90 |
-98 |
2 |
451 |
146 |
119 |
133 |
- |
- |
106 |
106 |
-124 |
3 |
446 |
188 |
82 |
135 |
- |
- |
140 |
140 |
+6 |
4 |
427 |
276 |
136 |
141 |
- |
- |
143 |
143 |
+70 |
5 |
423 |
152 |
130 |
142 |
- |
- |
120 |
120 |
-170 |
Me Qi Q3 |
427 424 446 |
188 152 276 |
119 96 130 |
141 135 141 |
- |
- |
120 106 140 |
120 106 140 |
- |
Стресс-устойчивыецыплята |
|||||||||
1 |
365 |
300 |
130 |
165 |
- |
- |
101 |
101 |
-75 |
2 |
363 |
292 |
100 |
165 |
44 |
48 |
128 |
128 |
0 |
3 |
396 |
278 |
81 |
151 |
52 |
74 |
94 |
94 |
+61 |
4 |
330 |
251 |
72 |
182 |
52 |
68 |
125 |
125 |
+61 |
5 |
392 |
160 |
148 |
153 |
- |
- |
134 |
134 |
-78 |
Me Qi Q3 |
365 363 392 |
278 251 292 |
100 81 130 |
165 153 165 |
- |
- |
125 101 128 |
125 101 128 |
- |
QRS была как отрицательной, так и положительной. По данным многочисленных исследователей, у птиц средняя электрическая ось отрицательна, в отличие от млекопитающих. В 1949 Sturkie [8] доказал, что отрицательный характер электрической оси желудочковой деполяризации связан с тем, что волна деполяризации начинается субэпикардиально и затем распространяется через миокард к эндокарду, у млекопитающих волна деполяризации начинается субэндокардиально. По данным [3], отклонения в электрической оси сердца у птиц не может служить критерием патологии и у цыплят часто связаны со стрессом, сопровождающим электрокардиографическое обследование.
Частота сердечных сокращений (ЧСС) у стрессчувствительных кур соответствовала 427 (424-446) уд./мин., у стресс-устойчивых - 365 (363-392) уд./мин. Различие показателей было статистически достоверно согласно U-критерию Ман-на-Уитни Р=0,009024. Медиана мак-симального значения интервала RR у стресс-чувствительных цыплят составляла 188 уд./мин., у стресс-устойчивых -278 уд./мин., медиана минимального значения - 119 уд./мин. и 100 уд./мин. соответственно, статистическая разница показателей не существенна (Р=0,17 и Р=0,67 соответственно). Показатель желудочковой деполяризации интервал QRS во втором отведении у цыплят с разной стрессовой чувствительностью был статистическиравнозначен(Р=0,754023)исоставлял у стресс-чувствительных цыплят 120 (106-140) мс, у стресс-устойчивых - 125 (101-128) мс.
Интервал QT соответствовал QRS вследствие не выраженности зубца Т, также не во всех исследованиях был выражен зубец Р.
Для электрокардиограмм не анестезированных цыплят характерно то, что волна Р маскируется волной Т и поэтому не бывает различима в большинстве случаев [5, 8, 9].
Важной особенностью является то, что для цыплят характерны два основных типа QRS комплексов RS и QS [4, 6, 10].
В нашей работе мы отмечали преимущество вышеуказанных комплексов. Рисунки 1-4 демонстрируют основные типы комплексов, регистрируемые в наших исследованиях, по каждому отведению, включая интервалы и зубцы Р, Р', Q, R, S, R', S', STj, ST, Т, Т\
Рис. 1. Электрокардиограмма цыпленка, комплекс RS типа, отрицательная QRS ось.
Рис. 2. Электрокардиограмма цыпленка, комплекс QS типа, отрицательная QRS ось.
Рис. 3. Электрокардиограмма цыпленка, комплекс QS типа с выраженным зубцом Е, отрицательная QRS ось.
Рис. 4. Электрокардиограмма цыпленка, комплекс RS, положительная QRS ось.
Учитывая особенности, связанные с наличием того или иного типа комплекса, обнаружением или отсутствием зубцов и интервалов Р, Q, Т, статистический анализ высоты зубцов и интервалов провести невозможно, поэтому в рамках данного исследования эти данные не имеют диагностического значения. Smith W. M., Gallagher J. J. (1986) [7] отмечают, что потери зубцов могут быть связаны с аритмией, обусловленной резкими выбросами катехоламинов в кровь вследствие стрессового состояния кур во время проведения электрокардиографии. А. М. P. Nap at al. (1992) [4] утверждают, что для получения более достоверных данных при кардиографическом обследовании необходимо использовать наркоз. Однако по нашему мнению, необходим справочный материал о влиянии различных наркотических средств на показатели электрокардиограммы кур и цыплят; в настоящее время такой материал отсутствует.
В таблице 2 представлены электрокардиограммы цыплят на фоне внутрикожного введения 70 % раствора скипидара в бородку.
Внутрикожное введение 70 % раствора скипидара, применяемое для оценки стрессовой чувствительности, как доказано в наших работах [2], являющегося раздражителем, запускающим неспецифические адаптационные реакции, которые по классификации Гаркави Л. X. с соавт. (1998) [1] можно отнести к стадии ориентировки стресса, не привело к статистически значимым изменениям в электрокардиограмме. ЧСС стрессчувствительных цыплят по сравнению с показателями, полученными
Таблица 2.
Интервалы ЭКГ цыплят после введения скипидара (II отведение)
Показатель |
ЧСС, уд./мин. |
R-R макс, мс |
R-R мин., мс |
R-R ср., мс |
Р, мс |
P-R (P-Q), мс |
QRS, мс |
QT, мс |
Ось QRS, О |
Стресс-чувствительныецыплята |
|||||||||
1 |
454 |
258 |
128 |
132 |
- |
- |
120 |
120 |
-102 |
2 |
430 |
403 |
92 |
140 |
41 |
41 |
71 |
71 |
-130 |
3 |
418 |
256 |
116 |
142 |
|
|
130 |
130 |
+61 |
4 |
406 |
312 |
112 |
148 |
|
|
131 |
131 |
+60 |
5 |
412 |
281 |
114 |
146 |
|
|
128 |
128 |
128 |
Me Qi Q3 |
418 412 430 |
281 258 312 |
114 112 116 |
142 140 143 |
- |
- |
128 120 130 |
128 120 130 |
- |
Стресс-устойчивыецыплята |
|||||||||
1 |
408 |
238 |
114 |
147 |
- |
- |
111 |
111 |
-100 |
2 |
397 |
367 |
89 |
151 |
41 |
49 |
94 |
94 |
-103 |
3 |
404 |
142 |
98 |
149 |
- |
- |
100 |
100 |
-90 |
4 |
423 |
220 |
74 |
142 |
40 |
50 |
66 |
66 |
-113 |
5 |
389 |
146 |
122 |
155 |
- |
- |
120 |
120 |
-41 |
Me Qi Q3 |
404 397 408 |
220 146 238 |
98 89 114 |
149 147 151 |
- |
- |
100 94 111 |
100 94 111 |
- |
в состоянии относительного покоя, в аб-солютном выражении снизилась, стати-стическая разница этого уменьшения, согласно критерию Вилкоксона, отсутствует (Р=0,500185). ЧСС стресс-устойчивых цыплят, наоборот, повышается в абсолютном выражении, разница статистически не существенна (Р=0,079617). Другие показатели у цыплят с разной стрессовой чувствительностью также не имеют существенных статистических отличий.
Приведенные данные указывают на отсутствие стимулирующего воздействия на сердечную деятельность внутрикожного введения раствора скипидара. Однако полученные результаты нельзя расценивать однозначно, вследствие того что в процессе кардиографического исследования цыплята подвергаются внешнему воздействию, возможно, оказывающему влияние на показатели исследования. К тому же умеренные повторные активационные воздействия, согласно теории неспецифических адаптационных реакций [1], вызывают реакцию тренировки, проявляющуюся в снижении активизации систем организма, вызывающих развитие адаптационного ответа. Данный вопрос требует дальнейшего глубокого изучения.
Выводы
Электрокардиографические исследования цыплят без использования средств для наркоза обладают малой информативностью вследствие большой вариабельности показателей, поглощением или отсутствием зубцов и интервалов Р, Q, Т. Невозможность оценить некоторые данные не позволяет методически верно провести статистическую обработку полученных данных. Электрокардиографические исследования являются раздражителем для цыплят, сила этого воздействия будет зависеть от мастерства экспериментатора и множества других факторов, что делает оценку степени воздействия практически невозможной. Поэтому использование электрокардиографических исследований в физиологическом эксперименте с использованием цыплят может носить лишь уточняющий характер. В процессе исследования цыплят с разной стрессовой чувствительностью обнаружены статистически значимые отличия в показателе ЧСС, которые в состоянии относительного покоя выше у стресс-чувствительных цыплят.
Список литературы
1. Гаркави, Л. X. Антистрессорные реакции и активационная терапия / Л. X. Гаркави, Е. Б. Квакина, Т. С. Кузьменко. - М. : Имедис, 1998. - 565 с.
2. Мифтахутдинов, А. В. Особенности лейкоцитарной реакции организма кур с разной стрессовой чувствительностью // Ветеринарный врач. - 2011. - № 4. - С. 39-43.
3. Castellanos, A. The resting electrocardiogram /A. Castellanos, R. J. Meyerburg // In Hurst JE (ed). - The Heart 6th ed. - New York. - P. 492.
4. Nap, A. M. P. Electrocardiogram of the African grey (Psittacus erithacus) and Amazon (Amazona spp.) parrot /A. M. P. Nap, J. T. Lumeij, A. A. Stokhof// Avian Pathology. - 1992. - № 21. - P. 45-53.
5. Owen, R. L. Physiologic and electrocardiographic changes occurring in broilers reared at simulated high altitude / R. L. Owen, R. F. Wideman, Jr., R. M. Leach, B. S. Cowen, P. A. Dunn, and B.C. Ford //Avian Disease. - 1995.-№39.-P. 108-115.
6. Sawazaki, H. Comparative electrocardiographical studies on the wave form of QRS complex in vertebrates / H. Sawazaki, H. Hirose, K. Matsui, K. Yamamori, I. Hanyu // Japanese journal of veterinary science — 1976. — № 38. - P. 235-240'
7. Smith, W. M. Mechanisms of arrhythmias and conduction abnormalities / W. M. Smith, J. J. Gallagher // J. W. Hurst (Ed.). - The Heart, 6th ed. - New York, McGraw-Hill. - 1996. - P. 406-432.
8. Sturkie, P. D. The electrocardiogram of chicken / P. D. Sturkie // American Journal of Veterinary Research 10.-1949.-P. 168-175.
9. Wideman, R. F, Jr. Electrocardiographic evaluation of broilers during the onset of pulmonary hypertension initiated by unilateral pulmonary artery occlusion / R. F. Wideman, Jr., Y. K. Kirby // The Poultry Science. - 1996.-№75.-P. 407-416.
10. Yamamoto, M. Evidence of dominant parasympathetic nervous activity of great cormorants (Phalacrocorax carbo) / Maki Yamamoto, Akiko Kato, Yan Ropert -Coudert, Masayoshi Kuwahara, Shinichi Hayama, Yasuhiko Naito // Physiology A Neuroethol Sensors Neural Behavior Physiology. - 2009. - № 195 (4).-P. 365-373.
Актуальные вопросы ветеринарной биологии № 1 (13), 2012