И.З. ХАЙРУТДИНОВ, Ф.М. СОКОЛИНА Казанский ГУ

Для представителей Protozoa характерен паразитизм. Особый интерес вызывают кровепаразиты. Среди внутриклеточных паразитов крови наиболее распространенными являются представители трех семейств - Haemogregarina, Hepatozoon и Karyolysus [1, 2, 5]. В настоящее время описано более трехсот видов.

Цель данной работы - выявить характер зараженности прыткой ящерицы Lacerta agilis (L. 1758) кровепаразитом Karyolysus lacertae (Danylewsky, 1889), в том числе уточнить вид паразита в крови рептилий; выявить внутри- и межпопуляционные различия в степени их зараженности.

Материал для исследований собирали в течение полевого сезона 2005 г. Взрослые особи прыткой ящерицы отлавливали в четырех популяциях на территории г.  Казани (выборки №  1  - 4) и охранной зоны Раифского участка Волжско-Камского государственного природного заповедника (выборка № 5).

Мазки крови готовили по общепринятой методике [4], окрашивали по Романовскому - Гимзе и просматривали под микроскопом. Размеры эритроцитов и их ядер измеряли при помощи окулярми-крометра и 40х объектива (цена деления окуляра-микрометра была 2,8 мкм). Фотосъемку проводили на микроскопе "Jenaval" с фотонасадкой и фотоэкспонометром "Expomet" с иммерсией при увеличении 1000. Всего было просмотрено 297 мазков периферической крови.

Представители рода Karyolysus известны только у ящериц двух семейств - Lacertidae и Scyncidae Старого Света. Кровяные простейшие отличаются от кишечных как по морфологии, так и по биологии. В теле кровепаразитов практически отсутствуют запасные питательные вещества, в небольшом количестве их встречают в макрогаметоцитах. Биология кровепаразитов определяется замкнутостью кровеносной системы. Инвазия идет из тела хозяина в тело переносчика и обратно. Поэтому у кариолизуса утрачивается потребность в защитных оболочках, выпадает стадия образования спор, что подчеркивает зависимость его жизненного цикла от локализации.

Смена хозяев обеспечивает лучшее распространение паразита. Усложняется его жизненный цикл, так как появляется промежуточный хозяин, в котором зародыш претерпевает очень сложные изменения. Это увеличивает шансы в борьбе за существование. Лишь в теле основного хозяина он способен к развитию и образованию потомства. В промежуточном хозяине обычно идет развитие зародыша или личинок, а в окончательном паразит достигает половой зрелости и размножается половым путем. Доказана трансовариальная передача этих паразитов трансмиссивным хозяином - гамазовым клещом.

ГС. Марков и соавт. [3] считают, что шизогония   кариолизуса   протекает   в клетках ретикулоэндотелия ящерицы, а половой процесс - в теле клещей.

Для этого вида характерно нетипичное множественное деление - синтомия, так как не обнаружена центросома, очень нечетко выглядит ахроматиновое веретено и поперечное деление хромосом. Происходит многократное деление ядра, не сопровождающееся плазмотомией. После определенного периода питания или роста организм испытывает повторное деление ядра. Паразит становится многоядерным. Но вскоре плазматическое тело распадается на число особей в соответствии с их количеством. Ядра растут и вновь делятся. Образовавшиеся особи проникают в ретикулоэндотелиальные клетки ящерицы и проходят цикл шизогонии. Этот цикл повторяется несколько раз. Появляются трофозоиты -питающиеся особи, которые дают начало гамонтам. Для кариолизуса синтомия представляет собой стадию бесполого размножения, формирующую микрогаметоциты и макрогаметоциты,часто сохраняющие грегариноподобную форму. При повторном делении микрогаметоциты образуют 4 микрогаметы. Спаривание микро- и макрогаметоцитов происходит за счет активного сближения червеобразных мерозоитов последнего, прогамного поколения. Считается, что это стадия подготовки к половому размножению кариолизуса, так как она в процессе гамогонии приводит к образованию гамет. Спаренный с макрогаметоцитом микрогаметоцит делится на два округло-овальных тельца - микрогаметы. В дальнейшем одна из них сливается с макрогаметой, в результате чего образуется зигота, которая у кариолизуса называется оокинетой. На этой стадии грегарино-подобный кариолизус укорачивается и принимает округло-удлиненную форму, а на стадии ооцисты - округло-эллипсоидную.

Готовая к делению ооциста увеличивается в размере, а спорозоиты кариолизуса удлиняются. Ооциста лопается, и спорозоиты кариолизуса потоком гемолимфы разносятся по телу клеща. При укусе   клеща   спорозоиты   со   слюной

Рис. 1. Трофозоит Karyolysus lacertae (Danylewsky) в эритроците прыткой ящерицы Lacerta agilis попадают в тело ящерицы.

Появление полового процесса в жизненном цикле кариолизуса влечет за собой усложнение - чередование диплоидных и гаплоидных фаз.

В эритроцитах ящериц встречают предполовые формы - трофозоиты и гамонты, развившиеся из мерозоитов заключительной генерации. При этом трофозоиты из периферической крови в гамонтов не превращаются. Гамонты образуются при агамном размножении в ретикулоэндотелии и, попадая в периферическую кровь, поражают другие эритроциты. Таким образом, трофозоиты и гамонты - представители различных поколений в развитии кариолизуса в промежуточном хозяине - ящерице, поэтому различно и их воздействие на эритроциты. Один из признаков, указывающих на присутствие гемогрегарин, -наличие многоядерных форм в периферической крови. Кроме того, очевидно их влияние на эритроциты. Меняется форма эритроцита, клетка часто гипертрофируется, растягивается, увеличивается ядро. Параллельно с этим идет деструкция гемоглобина, а также наблюдается изменение сывороточных белков [3]. Кариолизус имеет своеобразное строение в каждой стадии развития. Несколько поколений, предшествующих половому акту, отличаются морфологически и по способу деления.

При изучении мазков крови прыткой ящерицы мы выявляли как трофозоитов, так и гамонтов Karyolysus lacertae (рис. 1, 2).

Паразит имел вытянутое полупрозрачное тело, лишенное какой-либо капсулы. При этом оболочка паразита вступает в прямой контакт с ядром эритроцита. Г.С. Марков и соавт. [3] предполагают, что мембранное взаимодействие участвует в процессе избирательного проникновения веществ ядра эритроцита в тело активно питающегося паразита-трофозоита. Он расположен в клетке рядом с ядром, несколько охватывая его. Длина трофозоитов колеблется от 7,2 до 18,5 мкм, ширина - от 1,4 до 6,4 мкм. Ядро расположено центрально либо ближе к одному из полюсов. Длина его колеблется от 2 до 3,7 мкм, ширина примерно равна таковой трофозоита.

Основная функция трофозоита -питание. В результате этого меняется морфология пораженного эритроцита. На рис. 1 отчетливо видны различия между здоровыми и пораженными эритроцитами.

Рис. 2. Гамонты Karyolysus lacertae (Danylewsky) в эритроцитах прыткой ящерицы Lacerta agilis

Цитоплазма эритроцита и объем ядра увеличены почти в 2 раза. Нередко ядро как бы расплющено телом гамонта вдоль длинной оси эритроцита. Эти изменения - следствие токсического, кариолитического и механического воздействия паразита и, возможно, результат интенсификации жизнедеятельности ядра-прокормителя.

Таблица 1

Размеры эритроцитов крови здоровой и пораженной кариолизусом прыткой ящерицы, мкм

Таблица 2

Зараженность прыткой ящерицы L. agilis паразитом Karyolysus lacertae (Danylewsky)

Гамонты внешне отличаются от трофозоитов. Они имеют бесцветную капсулу, бобовидную или сосисковидную форму тела, а по размерам несколько крупнее трофозоитов. Цвет гамонтов более насыщен - розовато-фиолетовых тонов, ядро расположено центрально либо субцентрально, в виде перевязи. Иногда проглядываются нити хроматина. Некоторые клетки эритроцитов, пораженные кариолизусом, по размерам более чем в 2 раза превосходят здоровые. Ядра вытянутой формы (в 2 - 2,5 раза длиннее ядер нормальных эритроцитов), несколько сплющены и располагаются вдоль кариолизуса (табл. 1).

Функция гамонта - выжидание момента нападения на ящерицу клеща -окончательного  хозяина  кариолизуса.

Следовательно, это стадия покоя перед продолжением развития.

Проведенные нами расчеты дают основание предположить, что основной причиной различия в размерах эритроцитов и их ядер является механическое воздействие кариолизуса на ядерный и плазменный материал. К такому же выводу пришли Г.С. Марков с соавт. в 1979 г. [3].

По результатам собственных исследований наибольший процент зараженных кариолизусом особей отмечали в выборках № 3 и № 4 (табл. 2).

При этом самки были более поражены, чем самцы. Возможно, это связано с меньшей встречаемостью самцов прыткой ящерицы по сравнению с самками, что подтверждается и результатами учетов. Видимо, преобладание самок в популяциях является нормой для данного территориального и, возможно, полигамного вида. Также не исключено, что самцы, в силу своей высокой активности, реже атакуются клещами.

Для сравнения результатов учета плотности поселения ящериц в различных популяциях с данными по степени их зараженности использовали ранговую корреляцию Спирмена. При этом отмечали, что наблюдается положительная зависимость между числом особей на гектар площади и частотой встречаемости особей, зараженных паразитом Karyolysus lacertae (R=0,90; р=0,037) (рис. 3).

Рис. 3. Зараженность особей прыткой ящерицы Karyolysus lacertae в зависимости от плотности популяции: 1 - средняя плотность, ос./га; 2 -зараженность, %

Высокая  плотность поселения ящериц в популяции благоприятно влияет на возможность переноса паразита клещами, что в итоге приводит к интенсивному заражению. Напротив, популяции № 1 и № 5 характеризуются низкой встречаемостью прыткой ящерицы, в результате процент зараженных в них особей минимальный.

Заключение. Впервые в Республике Татарстан зафиксирован случай заражения прыткой ящерицы Lacerta agilis кровепаразитом Karyolysus lacertae (Danylewsky, 1889). Установлено, что наличие паразита в эритроцитах приводит к существенному увеличению размеров пораженных клеток и их ядер. Плотность населения прыткой ящерицы влияет на зараженность особей в популяции кариолизусом. Высокий процент зараженности самок, по-видимому, связан с низкой встречаемостью самцов и их более высокой активностью.

Полученные нами данные предварительны и могут быть дополнены в ходе дальнейших исследований.

ЛИТЕРАТУРА

1. Васильев Д.Б. Черепахи. Болезни и лечение. - М.: Аквариум ЛТД, 1999.

2. Васильев Д.Б. Ветеринарная герпетология: ящерицы. - М.: Про-ект-Ф, 2005.

3. Марков Г.С., Ваккер В.Г., Яворский М.И. Первая находка кариолизуса у прыткой ящерицы в Казахстане//Сб. науч. тр. Кубан. гос. ун-т. -Краснодар, 1979.

4. Стенко М.И. Приготовление, фиксация и окраска мазков//Справочник по клиническим и лабораторным методам исследования. - М.: Медицина, 1975.

5. Ярофке Д., Ланде Ю. Рептилии. Болезни и лечение / Пер. с нем. И. Кравец. - М.: Аквариум, 1999.

журнал "ветеринария " №12 2007