В литературе отсутствуют сведения, описывающие эмбриогенез лошади с 6 до 30 суток. Этот отрезок является важным критическим периодом, когда протекают начальные этапы органогенеза, обособляются части тела, дифференцируются провизорные органы: желточный мешок, амнион, аллантоис, и хорион, наступает имплантация бластоцисты и установления топографии зародышевого пузыря
По данным А.Н.Буйко, П.Н.Скаткина (I960) у кобыл после овуляции фолликула, в течение 24-36 часов, в первой трети яйцепровода имеется зигота с общим диаметром 161,6 мкм, прозрачная оболочка которой имеет ширину 16,6 мкм. Дробление зиготы полное и неравномерное, идет медленнее, чем у других животных. На 6-8 сутки бластоциста поступает в рог матки. Прозрачная оболочка в ней разрывается на 8 день и она начинает быстро расти.
Известно, что у животных ранний эмбриогенез стимулируется локальными (донервными) медиаторами, как ацзтилхолин, катехолин, серотонин. Они на внутри- и межклеточном уровне рагулируют дробление и начало гаструляции, межклеточные взаимодействия, макромолекулярные синтезы в тканях, имплантацию бластоцист (Г.А.Бузников, 1967).
Наши исследования роста и топографии зародышевых пузырей в матке показали, что у кобыл, в течение первых четырех месяцев иеребости происходят интенсивные формообразовательные процессы в бластоцистах, в зародышевых и ранних плодных пузырях, их имплантация и плацентация. Асимметрия, увеличение окружности беременного, позже небеременного рогов матки возникали синхронно с развитием зародышевых пузырей» В течение первых 90 суток масса беременной матки увеличивается с 400,0 г до 2 кг, на 150 сутки составляет более 4 кг. Размеры рогов матки за эти сроки жеребости возрастают от 22x11 до 63x43 см. В дальнейшем преобладает рост рогов в ширину. В первые три месяца жеребости беременный рог содержит до 200-300 мл желтоватой жидкости с хлопьями, на НО сутки количество ее составляет I л, жидкость становится мутной с зеленоватым оттенком и хлопьями. Образование жидкости в беременном роге связано с развитием маточных аелез, пролиферацией и секрецией гландулоцитов» Отделением жидкости дегенерирующихся эндометриальных чаш, трансудацией лимфы из расширенных лимфатических капилляров, развитием новых овуляций пузырчатых фолликулов в начале жеребости. На накопление жидкости влияют высокие складчатые перегородки рогов, перистальтические и антиперистальтические сокращения миометрия. В беременной матке накопление жидкости создает среду для развития зародышей, овлаяшяет поверхность эндометрия, скапливаясь у основания и середине рога, изменяет его рельеф.
В начале к эндометрию прилипают складки трофобластического хорина, далее аллантохориона и наступает гистотрофное питание зародыша. Допускают, что бластоциста,выделяя ферменты в матке, вызывает децидуальные реакции - деление и развитие соединительнотканных клеток, миграцию лейкоцитов, расширение кровеносных сосудсзв и капилляров, увеличение проницаемости их стенок. В жидкости бластоцисты содержатся питательные вещества, антигены, стероидные гормоны '(Б.П.Токин, А.Г.Филатова, 1953; Е.В„Зыбина,1958).
Механизм имплантации бластоцист у млекопитающих мало исследован и единой теории о ней нет (Е.К.Кричинская, 1967). Не выяснена четкая граница между имплантацией и началом плацентации (Е„В„Зыбина, 1958).
Нами впервые получены данные о последовательности роста, развития бластоцист, зародышевых пузырей лошадей в первые четыре месяца жеребости и описана топография их зз рогах матки. Рост зародышевых пузырей происходит неравномерно. Масса бластоцист и зародышевых пузырей составила: на 20 сутки до 1,0 г,на 25- более 3,0 г, к 30-35 суткам 12-18 г, на 45-50 сутки - 30,0-60,0 г, на 50-60-70 сутки - до 100,0 г, на 80-90 - до 130,0 г, на 100 сутки - 200,0-300,0 г и на 110 сутки более 500,0 г.
С 15 по 50 сутки жеребости в беременном роге располагались округлые зародышевые пузыри диаметр их составил 1,5-9,5 см. С 50 суток пузырь постепенно удлиняется, к 90 суткам занимает почти весь беременный рог, частично небеременный. При перемещении его с одного во второй рог, высокие складчатые перегородки катки замедляют перемещение пузыря и он равномерно распределяется и имплантируется» Изменения положения пузыря в роге способствуют смещению жидкости в нем, ритмическое сокращение кольцевого и продольного слоев миометрия.
На 100-11О сутки форма плодного пузыря становится трехраздальной, занимает он полностью рога и тело матки. Размеры левой и правой половин пузыря достигают до 63,0x43,0 см, а в средней части - 31,0x9,0 см. В ранних зародышевых пузырях, с 20 по 50 сутки жеребости, хорошо развито сосудистое кольцо желточного мешка, состоящее из 2-3 рядов циркулярных сосудов. Тело эмбриона удерживается желточным мешком до образования пуповины и дифференцировки плаценты.
Известно, что у лошади желточный мешок бластоцисты способствует сохранению беременности. Между 20-25 днями жеребости наступает дифференцировка желточной плаценты. На 28 день развития желточный мешок веретенообразный, располагается между аллантоисом и пупочными сосудами, стенка его многоскладчатая, складки у его основания срастаются с мезенхимой хориона. Наибольшего развития желточный мешок эмбриона лошади достигает на 4-2-день жеребости и сохраняете^ до 105 дня беременности (Р.Бокнэ, 1898; Л,Франк, 1909; В.К,Милованов, 1962; Р.Д.Юзликаев и др., 1978; Р.Ханнер, 1984).
На 30-35 сутки в пузырях трофобластичаский хорион имплантирован частично к эндометриальньш чашам и низким окладкам слизистой оболочки матки, к 70 суткам складки аллантохориона имплантированы плотно» На 80 сутки наступает плацентация.
Процессу имплантации трофобластического хориона и аллантохориона зародышевых пузырей с 30 до 70 сутки жеребости способствует возрастающее содержание гликопротеивов в тканях эндометрии, особенно кислых кукопротеинов. Последние вызывают прилипание складок хориона зародышевых пузырей.
Известно, что у лошади трофойласт бластоциезгы имеет короткие ворсинки, а эпителий их снабжен микроворсинками. Имплантация грофобласта наступает на 37 день и на 45 день на алланго-хориона имеются рудиментарные ворсинки, которые диффузно внедряются в крипты матки (Р.Хантер, 1984), К 60 дню развития эмбриона, складки трофобласта и прилегающий к ним эпителиальный слой эндометрия образуют зачатки микрокотиледона. На 75-100 дни на стволовых складках хориона возникают вторичные складки с разветвленными ворсинками, они образуют микрокотиледоны. Каждая из них окружена соединительнотканной капсулой и вступает в контакт с небольшим безжелезистым участком эндометрия, но хорион еще сплошь неимплатирован (С.A. Samuel et ai, 1974, 1976). С 80 суток жеребости на хорионе имеются разветвленные ворсинки и зародышевый пузырь вступает в стадию проникновения криптам эндометрия. Наступает стадия плацентации.
При генезе плаценты возникает ряд приспособительных изменений: васкуляризация, гипвремиЯ| образование складок и септ эндометрия, увеличение размеров нейронов, миелинизация нервных волокон, интрамуральных нервных сплетений, что повышает кровоснабжение и иннервацию матки. В бластоцисте усиливается рост трофобласта, образование складок, ореол, дифференцировка хориона (Н.А. Жеребцов, 1967; К.М.Курносов, 1975 и др.).
Плацента - полифункциональный орган, обеспечивающий всесторонний обмен веществ между развивающимся- эмбрионом-плодом и организмом матери. Она выполняет следующие основные функции: трофическую (гистотропноа и гемотропное питания) и газообмена у эмбриона, эндокринную, защитно-барьерную, антитоксическую, компенсаторную, кровоостанавливающую и другие. В плаценте накапливайся витамины А, В, С и через ее ткани проходят к плоду гормоны Предполагают, что посредством медиаторов плацента участвует в проведении нервного импульса от матери к плоду (Н.В.Медведева, 1946; Е.М.Беркович, 1948; С.И.Трусов, 1951; Г.А.Шмидт, 1955; ЛоТ.Капралова, 1963; И.Т.Питкянян, М.И,Прокофьев, 19§6; Н.Л.Гороховский, 1972, 1984; К.М.Курносов, 1975 и .др.).
По нашим данным с 80 суток жеребости на хорионе плода лошади формируются разветвленные ворсинки и зародышевый пузырь вступает в стадию проникновения ворсинок хориона в крипты эндометрия, то-есть наступает стадия плацентации.
На 80-90 сутки жеребости в плодном пузыре дифференцированы микрокотиледоны. Они более развиты в средней части, на месте расположения плода. Ворсинки хориона выстланы однослойным призматическим эпителием с прилегающей мезенхимой. Ворсинки микрокотиледон плотно не контактируют с септами эндометрия матки,
У эмбрионов лошади первых двух месяцев жеребости амнион прозрачный, не выявляются кровеносные сосуды, содержит 5-10 мл жидкости.
На 70-75 сутки яеребости у предплодов амнион прозрачный, количество жидкости достигает до 40 мл. Из стенки пупочного канатика отходят 4-5 магистральных кровеносных сосудов» Они разветвляются в стенке амниона, начиная со стороны живота эмбриона.
На 90-100 сутки стенка амниона содержит крупнопетлистую сеть,наполненных кровью кровеносных сосудов. Они более развиты в области прилегания головы, таза и на боковых стенках амниона. Количество амниотической жидкости достигает до 120 мл. она желтоватого цвета с хлопьями мекония.
На 110-120 сутки развития число магистральных сосудов,, отходящих в амнион от пупочного канатика, достигает 7-8. В стенке амниона разветвления кровеносных сосудов образуют крупнопетлистую сеть. Кроме крупных сосуйов выявляются наполненные кровью, извилистые, сложне-разветвленные кровеносные мелкие сосуды. Амнион прозрачный, содержит до 250-500 мл желтоватой или мутной жидкости с хлопьями и примесью мекония» Мы полагаем, что жидкость амниона является транссудатом с примесью экскретов и секретов кишечника, кожи и других примесей тканей, что согласуется с литературными данными (Ц.Цанков, Р.Прахов, 1971).
У кобыл до 40 суток жеребости ранние зародышевые пузыри округло-овальные образованы трофобластическим хорионом, амнионом к сосудистым полем желточного мешка. Пуповина дифференцируется на 45 сутки, длина ее 3-4, диаметр - 1 см. На 60-70 сутки размеры пуповины достигают соответственно 6-7 и 2,5 см.
На 90 сутки жеребости на хорионе плодного пузыря еще сохраняется сосудистое кольцо.желточного мешка с диаметром I,1-1,6 см. К нему прикрепляется стебель амниона. Пуповина достигает длины до 8-12 см, диаметра 3-4 см и образует один спиральный поворот и она содержит две пары пупочных сосудов Между сосудами проходит урахус От вартонового студня пуповины отходят магистральные сосуды к амниону и по малой кривизне пузыря к алланто-хориону.
Не 100 сутки в плодном пузыре облитерируется сосудистое кольцо желточного мешка. Пуповина плода содержи! три кровеносных сосуда. Длина пуповины достигает 14-15 см и имеет два спиральных изгиба» На 110-120 сутки жеребости длина пуповины плода достигает 21, диаметр - 7 см, она содеркит две пары сосудов, соединенных между собой анастомозами. Слизистое основное вещество пуповины более плотное, от него отходят кровеносные сосуды к амниону. Стебель пуповины образует 1,5-2 спиральных идгиба. Кровеносные сосуды разветвляются от пупочных сосудов в начале на две, затем каждая из ветвей еще на 5-6 ветвей, направляющихся к хориону. ИоА.Бочаров и др. (1957) отмечают, что у зрелых плодов лошадей пуповина достигает длины до 100 см, образует 5-10 спиральных изгибов, что объясняется поворотом плода и неравномерным ростом артерии. Сосуды тесно сращены с пупочным кольцом и студенистой массой Вартони.
Известно, что рост организма и его частей протекает неравномерно и охватывает такие признаки, как длительность, скорость и периодичность. Развитие организма включает в себе рост и дифференциацию клеток, тканей и органов. Основная часть процессов роста происходит в эмбриональный период и условия эмбрионального роста влияют на формообразования (А.А.Малигонов, 1968; Б.П.Токин, 1970; В.И.Федоров, 1973 и др.).
По росту и формированию телосложения, органогенезу и топо-графическим особенностям отдельных систем у эмбрионов лошадей исследования еще мало (И.Н.Чашкин, П.П. Богданов, .1952; О.Ф.Яновский, 1954; И.К.Переяславский, 1957; Г„В.Паршутин, I960; B.C. Бурякин, 1961; П.П.Богданов, 1962; К„М.Курносов, 1973; В.В.Шу-лов, 1978 и др.). Существует попытка определить периодичность роста эмбрионов лошадей по Г.А.Шмидту (П.П.Богданов, 1962; К.М. Курносов, 1973; В.П.Гончаров, 1984; К.Б.Свечин и др., 1984). По данным упомянутых авторов большую разницу сроков роста имеет зародышевый период, что связано с малой изученностью данного отрезка эмбриогенеза. Зародышевый период длится с 1 по 40-45 дни жеребости; предплодный период с 41-46 по 70-96 дни; плодный период с 75-97 суток до конца жеребости.
С учетом ритмичности роста и дифференцировки эмбрионов-плодов, их провизорных органов, а также изменений, происходящих в репродуктивных органах кобыл, мы рекомендуем разделить эмбриогенез лошади на следующие периоды:
1. Зародышевый период: охватывает с 1 по 50 сутки жеребости. В этот период зигота, бластоциста, зародышевый пузырь свободно располагаются в начале в яйцепроводе, затем в роге матки в окружении биологически активной жидкости. Способы питания и дыхания зиготы и дробящихся зародышей внутриклеточные и через прозрачную оболочку, в бластоцисте - посредством трофобласта, а в округлых зародышевых пузырях - через сосуды желточного мешка и трофобластический хорион. Развитие медленное, обособляется изогнутое тело эмбриона, происходит начальная стадия закладки органов.
2. Предплодный период: начинается с 51 суток, длится до 70 суток. Характеризуется тем, что зародышевый пузырь удлиняется, дифференцируется желточная плацента, складки алланто-хориона и имплантируются к эндометрию при участии кислых гликопротеинов матки. Начинается интенсивный органогенез. Эмбрион более развит, тело выпрямляется, откинута голова, удлинена шея, брюхо вздутое и фаланги конечностей имеют зачатки копытец.
3. Плодный период длится с 71 по 330 сутки жеребости, дифференцируется диффузная плацента эпителио-хориального типа. Усиливается рост тела и его частей, формируются видовые признаки лошади: особенности головы, шеи, туловища, конечностей, в фалангах последних сформированы копытца. Ритмично растут внутренние органы. К моменту рождения масса жеребенка составляет более 20 кг, длина тела более 1 м. Рост и дифференциация организма и органов продолжается в постнаталъвый период.
Наши данные по формообразованию и изменению топографии органов эмбрионов-плодов лошадей показали, что на 10-12 сутки эмбрионы развиваются на стадии вейруллы и закладки первичных сегментов. На 15 сутки их изогнутое тело окружено амнионом.
На 30-35 сутки тело зародыша имеет длину около 1 см, С образно изогнутое8 окружено амнионом, в нем эмбриов легко смещается. Через трофобласгический хорион эмбрион просвечивается»
На 50, 60, 65 сутки (длина тела достигает 5,5-8,0 см), у эмбрионов-предплодов сформированы части тела спина еще изогнута, туловище равномерно расширено, мордочка направлена вниз и располагается между грудными конечностями Глаза большого размера. Заложена складка наружного уха. На голове выражены теменные и затылочные выступы» Шея изогнута, короткая и тонкая. В затылочной области она истончена. Грудные конечности выпрямлены от плечо-лопаточного сустава, а тазовые согнуты в тазо-бедренном и скакательном суставах и подобраны к брюху. В конечностях заложены светлые копытца, заметны хрящевые заклад-ки ребра. Обособлен хвост длиною 1,0-1,2 см.
На 70-75 сутки длина тела достигает 9,0-10,0 см, у предплода происходит дальнейшее развитие туловища, шея выпрямлена, несколько сужена она к нижве-челюстному суставу» Голова большая, разогнута. Ротовая щель закрыта, заметна глазная щель.Лобные и теменные кости черепа светлые. Брюхо вздутое и округленное. Грудные конечности скрещены, согнуты в запястных суставах и подобраны под брюхо. Тазовые согнуты в скакательных суставах. В конечностях сформированы светлые копытца. В кояице, особенно в области брюха, шеи и головы, выражены магистральные ветвящиеся кровеносные сосуды. Дифференцированы ребра и мускулы.
На 8090 сутки (длина тела 1416 см) туловище округленное, голова слегка согнута, мордочкой направлена к груди, дифференцированные веки замкнуты, ротовое отверстие слабо раскрыто. Удлиненная шея суяена к нижнечалюстному суставу. В большинстве случаев конечности перекрещены и согнуты в запястных, скакательных, заплюсневых суставах и подобраны к брюху. В копытцах разграничены хрящевая стенка, кайма и подошва. Дифференцированы анус, срамные губы и клитор. Хвост удлинен, кончик его достигает уровня пяточных бугров.
На 100 и 110 сутки (длина тела плода 21-24 см) спина плода выпрямлена, голова согнута, сформированы ноздри, ротовое отверстие, глаза закрыты веками. Складки ушных раковин имеют округлое основание, шея слегка изогнута. Брюхо равномерно вздутое. Копытца конусовидной формы, в них выражены белой окраски хрящевая стенка, кайма и стрелка подошвы. Задние ноги скрещены в области фаланг и направлены к пуповине.
На 120-130 сутки (длина тела плода 28 см) у плода туловище равномерно расширено, шея короткая, слегка изогнутая. Голова массивная, мордочкой направлена вниз. Губы сомкнуты. Хорошо заметен теменной выступ» Грудные конечности согнуты и подобраны под брюхо, а тазовые согнуты в тазобедренных и скакательных суставах и фалангами отодвинуты назад.
Таким образом, у предплодов лошади видовые признаки формируются на 4 месяце эмбриогенеза, к началу плодного периода.
С 3-4 месяцев до конца беременности происходит интенсивный рост тела, развитие органов пищеварения, эндокринных желез и других систем, продолжается окостенение скелета.