Е.Ф.Забегина, К.П.Юров
Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им.
Я.Р.Коваленко, Москва
Вирусный артериит - контагиозная болезнь однокопытных, вызываемая вирусом, относящимся к роду артеривирусов семейства Arteriviridae. Впервые вспышка вирусного артериита лошадей была зарегистрирована в 1953 году в США, в городе Охио, во время которой был выделен штамм вируса Bucyrus (Doll с соавт, 1957). В течение многих лет вирусный артериит относили к группе вирусных болезней, объединяемых под названием "грипп" Строение генома и стратегия его репликации чрезвычайно сходны с таковыми у корона- и тогавирусов, поэтому многие годы этот вирус относили к семейству Togaviridae. Однако, учитывая некоторые уникальные особенности этого вируса, в 1991 году Международным комитетом по таксономии вирусов он был выделен в отдельное семейство Arteriviridae. Болеют в основном лошади, но есть сообщения о заболеваниях ослов, мулов, зебр (Paweska с соавт., 1994, 1997) Разберем наиболее важные характкристики вируса.
Классификация вируса
Род: Arterivirus
Семейство; Arteriviridae (до недавнего времени относили к семейству Togaviridae)
Морфология и физико-Мимические свойства вируса
Вирус содержит инфекционную РНК с молекулярным весом 4х106 Д и длиной 12.7 kb Вирион окружен липидной оболочкой и имеет икосаэдрический нуклеокапсид. Диаметр вириона 50-70 нм. Имеется только один серотип вируса, однако, наблюдается антигенная вариабельность среди различных изолятов Вирус устойчив к трипсину, инактивируется 1%-ным р-ром хлористого магния при 50°С.
Распространенность заболевания
Наиболее значимые вспышки инфекции среди лошадей регистрировались в странах: США (Doll с соавт, 1957; McCoIlum & Swerczek, 1978; Timoney & McColIum, 1985; Timoney с соавт.. 1986; Collins : соавт,1987, Hall, 1989), Швейцарии (Burki, 1970; Gerber с соавт ,1978), Польше (Golnik с соавт "95" 1991), Австрии (Nowotny, 1991), Канаде (Clayton, 1987; Carman. 1988}; единичные вспышки = Великобритании (Chirnside, 1995; Westcott, 1997). Однако серопозитивные к вирусному артерииту выявлены практически во всех странах. Такие данные имеются по следующим странам:Англия. Германия, Испания, Ирландия, Португалия, Югославия, Швеция. Франция, Дания, Нидерланды, Италия, Морокко, Египет, Эфиопия, Сенегал, Япония, Иран, Индия, Новая Зеландия, Австралия, (Chirnside, 1992, 1995), Россия, Украина, Белорруссия, Латвия, Литва, Эстония, Казахстан,
Пути передачи инфекции
Существуют два принципиально важных пути передачи вируса:
1. При прямом контакте капельным респираторным путем. При остром течении инфекции большое количество вируса выделяется при кашле и с носовыми секретами, вирус присутствует в крови, моче, фекалиях и сперме, абортированные плоды также являются опасными источниками вируса, в некоторых случаях вирус может присутствовать только в сперме, причем перманентно.
2. Половым путем при случке. Жеребцы на ранних стадиях инфекции выделяют вирус в высокой концентрации со спермой, этот период может затянуться от нескольких месяцев до нескольких лет, что может привести как к клинической, так и к бессимптомной форме инфекции. В зависимости от этого инфицированных жеребцов делят на три категории:
2-5 недель после заражения; 3-8 месяцев после заражения; много лет и, возможно, пожизненно
К сожалению, большое количество жеребцов попадают в 3-ю категорию и выделяют вирус еще многие годы после того, как исчезнут клинические признаки болезни Вирус постоянно выделяется со спермой, в результате чего восприимчивые кобылы могут быть инфицированы Жеребцы-вирусоносители всегда являются серопозитивными к вирусу артериита, но не все серопозитивные жеребцы являются вирусоносителями. Титры антител в реакции нейтрализации (РН) могут быть очень низкими - 1:4 и варьировать, при этом клинически жеребец выглядит абсолютно здоровым
Вирус может передаваться и через замороженную сперму при искусственном осеменении.
В настоящее время считается (Westcott, 1997). что кобылы не могут являться носителями вируса. Серопозитивные кобылы со стабильными титрами антител при отсутствии клинических признаков болезни не опасны для контактирующих с ними животных. То же самое касается молодых кобыл, годовичков, жеребят и меринов.
Однако нарастание титров антител с течением времени говорит о недавней инфекции и о том, что животное может быть источником вируса для контактирующих с ним лошадей.
Клинические признаки
Заболевание может протекать в острой, субклинической форме и в виде персистентной (бессимптомной) инфекции. Острое течение вирусного артериита наблюдается во время энзоотических вспышек или эпизоотии.
Инкубационный период болезни колеблется от 3 до 14 дней (в среднем 7 дней) при аэрогенном или контактном заражении и 6-8 дней при заражении половым путем.
При остром течении болезни наблюдают повышение температуры тела до 41° С, угнетение, скованные движения, отеки подкожной клетчатки в области конечностей, особенно задних, препуция и мошонки у жеребцов и вымени у кобыл, иногда кожную сыпь на шее, голове и других частях тела. Жеребые кобылы абортируют на 3-10 месяцах жеребости. Аборты происходят в острой фазе заболевания или же в период выздоровления при отсутствии видимых признаков болезни В период вспышки могут абортировать 10-70% кобыл.
Больные и переболевшие жеребцы утрачивают свою репродуктивную функцию в течение 6-7 недель вследствие воспаления тестикул
Острая быстротекущая инфекция у жеребят, как правило, не вызывает значительного отхода. Однако при экспериментальном заражении взрослых лошадей через органы дыхания погибает до 60% животных. У больных жеребят может наблюдаться интерстициальная пневмония и фибринозно-некротический энтерит.
Вирус от больных лошадей выделяется в течение 2-3 недель из органов дыхания со слизью, истечениями из глаз, мочой, а также содержится в плодных оболочках и водах, органах абортированных плодов, сперме.
Персистенция вируса имеет место только у жеребцов и бывает 2-х видов: кратковременная (несколько недель) и длительная хроническая до нескольких лет. Персистентно инфицированные жеребцы при случке со спермой передают вирус кобылам. Заражению могут подвергаться 85-100% кобыл, бывших в случке с жеребцом-вирусоносителем.
У переболевших, а также вакцинированных лошадей формируется напряженный иммунитет. Жеребята, рожденные от серопозитивных кобыл, получают материнские кололстральные антитела, которые защищают их в течение первых недель жизни, но к 2-6 месяцам жеребята становятся серонегатитвными.
Диагностика
Вирусный артериит дифференцируют прежде всего от гриппа и вирусного аборта - ринопневмонии. Решающее значение имеет лабораторная диагностика, включающая серологические исследования и выделение вируса. Стандартными международными серологическими тестами, утвержденными Международным Эпизоотическим Бюро (МЭБ), являются реакция нейтрализации и выделение вируса в культуре клеток.
В качестве альтернативных методов диагностики используются РСК, ИФА, ПЦР (полимеразная цепная реакция).
Для серологического исследования направляют пробы сыворотки крови в количестве 3-4 мл без консерванта; для выделения вируса используют назо-фарингиальные смывы, сперму жеребцов, цитратную кровь, в случае гибели - кусочки паренхиматозных органов, средостенные и бронхиальные лимфоузлы; материал направляют в лабораторию без консервантов в термосе со льдом.
Диагностическим титром при исследовании сыворотки крови в реакции нейтрализации против 100 ТЦД so/мл вируса считают разведение 1:4 и более:
выявление антител в крови жеребцов (1:4 и более) является показателем персистентной вирусной инфекции, такие жеребцы могут предавать вирус половым путем;
с целью подтверждения диагноза у ценных жеребцов-производителей проводят выделение вируса из спермы.
Для решения вопроса о возможности вирусоносительства у вакцинированного против вирусного артериита жеребца-производителя ставится биопроба на двух серонегативных кобылах. Через 14 и 28 дней после случки с проверяемым жеребцом у кобыл берут пробы крови и исследуют в РН. Жеребец считается свободным от вируса артериита, если в сыворотке крови кобыл не будут выявлены антитела.
Лечение
Специальных рекомендаций по лечению вирусного артериита не разработано Есть сообщения об успешном применении нестероидальных и противовоспалительных препаратов, а также тестостерона для жеребцов {Little, 1991).
Жеребцы случного возраста, положительно реагирующие на вирусный артериит, не представляющие племенной ценности, подлежат кастрации
Категорически запрещается случка жеребцов-вирусоносителей, а также использование спермы от них для осеменения благополучных кобыл.
Жеребцов-производителей допускают к случке с благополучными кобылами после получения отрицательного результата вирусологического исследования их спермы и двукратного, с интервалом в 30 дней, отрицательного результата исследования сыворотки крови в РН.
Вакцинопр офилакт и на
Ни одна вакцина не лицензирована для применения в Европе (Westcott, 1997). Однако разработаны и применяются:
в Америке (Timoney с соавт,, 1988) - модифицированная живая вакцина (MLV) из вируса.
аттенуированного для лошадей множествеными серийными пассажами в клетках почки лошади и
кролика {вакцинация жеребят старше 6 недель и кобыл во время 2-х последних месяцев
жеребости запрещена);
в Японии (Fukunaga с соавт., 1984, 1990) - инактивированная культуральная формолвакцина (вакцинация жеребых кобыл разрешена).
Вакцины применяются в странах, в которых были зарегистрированы вспышки инфекции Неоднократно отмечалось, что вакцинация живой вакциной является риском того, что вакцинный вирус может реверсировать и вызывать инфекцию (Chirnside, 1992, 1996).
Заключение
В лаборатории вирусологии ВИЭВ на протяжении 15 лет ведутся диагностические исследования ьз вирусный артериит преимущественно крови лошадей, направляемых на экспорт. Ни одной вспышк,-инфекции не было зарегистрировано на территории нашей страны, однако имеются серопозитивнье животные. Такую статистику можно проследить на примере последних четырех лет. В 1997 году Haw было исследовано 299 проб сыворотки крови лошадей, из них - 115 положительные (т е. 38,46% отчие." исследованных животных были серопозитивными) , 184 отрицательные (6154% от общего читга исследованных). 1998 год - исследовано 145 проб, из которых 32 положительны (22,06%), 112 - отрицательны (77,94%) В 1999 году всего исследовано 477 проб, из них положительных - 82 (17,19%), отрицательных -395 (82,81%). В текущем 2000 году с января по сентябрь исследовано 1111 проб, из которых 314 положительны (28,26%), 797 отрицательны (71,74%). Данные представлены в таблице.
Годы |
Общее количество исследованных лошадей за год |
Из них Из них серопозитивных серонегатитвных |
1997 |
299 |
38,46% 61,54% |
1998 |
145 |
22,06% 77,94% |
1999 |
477 |
17,19% 82,81% |
2000 |
1111 |
28,26% 71,74% |
Попытки выделить вирус из крови серопозитивных лошадей в культуре клеток были безуспешными. Таким образом, в целом ситуация по вирусному артерииту лошадей у нас в стране может расцениваться как благополучная. Однако необходимо строго придерживаться правил, предусмотренных при выявлении серопозитивных животных; четко знать происхождение спермы, применяемой для искусственного осеменения; исследовать кровь лошадей после их миграции на дальние расстояния.
Список литературы
1. Дорофеев К.А., Крюков Н.Н., Садиков В.Е. Вирусный артериит. - в кн. «Вирусные болезни лошадей», Москва, Колос, 1973, стр.83-90.
2. Юров КП Профилактика вирусных болезней лошадей -Москва, Колос, 1984, стр. 116-125.
3. Юров К П. Инфекционные болезни лошадей ~ Москва, Росагропромиздат, 1991, стр. 53-61.
4. Burki F.The virology of equine arteritis virus. - Proc. 2nd Int. Conf on Equine Inf. Dis., Paris, 1969, pp.125-129.
5. Carman S. Tquine arteritis virus isolated from a standardbred foal with pneumonia. - Can. Vet. J., 29, 1988, p.937/
6. Chirnside E.D, & Spaan W.D. Reverse transcription amd cDNA amplification by the polimerase chain reaction of equine arteritis virus (EAV). - J. Virol. Meth., 1990, 30, pp. 133-40,
7. Chirnside E.D. Equine arteritis virus: an overview. - Brit. Vet. J., 1992, 148, pp.181-197.
8. Chirnside E.D. et ai. Development and evaluation of an ELISA using recombinant fusion protein to detect the presence of host antibody to equine arteritis virus.-J. Vir. Meth., 1995, 54, pp.1-13.
9. Doll E.R., Knappenberger R.E. & Bryans J.T. An outbreak of abortion caused by the equine arteritis virus. Cornell Vet., 1957, 47, pp. 69-75.
10. Doll E.R. et al. Immunisation against equine arteritis virus using modified live virus propagated in cell cultures of rabbit kidney. - Cornell Vet., 1968, 58, pp.497-524.
11. Fukunaga Y., Wada R., Marsumura T. et al. An attempt to pritect persistent infection of equine viral arteritis in the reproductive tract of stallions using formalin inactivated vaccine. - Proc. 6th Int. Conf. on Equine Vir. Dis., 1991, Cambridge
12. Gerber H. et al. Serological Investigations on equine arteritis virus. - Proc. 4th Int. Conf. on Equine Vir.
Dis., 1978, Lyon, pp/461-465.
13. Golnik W. Viruses isolated from aborted foetuses and stillborn foals. - Proc. 6th Int. Conf. on Equine Vir. Dis,, 1991, Cambridge
14 McCollum W.H. Responses of horses vaccinated with avirulent miodified-live equine arteritis virus propagated in E.derrn (NBL-6) cell line to nasal inoculations with virulent virus. - Am. J. Vet. Res., 1986, 47, pp. 1931-1934.
15. Mumford J.A. Preparing for equine arteritis. - Equine Vet. J., 1985, 7, pp. 6-11/
16. Timoney P.J, McCollum W.H. et al. Status of EAV in'Kentucky. - J. Am. Vet. Med. Ass., 1985, 191, pp. 36-39.
17 Paweska J.T. et al. A survey for ntibodies to equine arteritis virus in donkeys, mules and zebra using virus neutralisation (VN) and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). - Equine Vet. J., 1997, 29, pp. 40-43.
18. Westcott D. - The isolation of equine arteritis virus (EAV) from equine semen. - CVL Weybridge Vir. Meth., 1997, D76, pp. 1-7.
19. Yurov K.P., Zabegina E.F. Examination of circus horse sera for equine viral arteritis and equine infectious anemia. - Journal of Equine Veterinary Science (USA), 1999, vol. 19, 6tfl World Equine Vet. Ass. Congr, Paris, France, abstr., p.56.