Кудряшов А. А., Кузьмин В. А., Забровская А. В., Балабанова В. И.
ФГБОУ ВПО «Санкт-Петербургская государственная академия ветеринарной медицины»
Введение
Развитие современного козоводства в России сопровождается ростом поголовья продуктивных и племенных животных, в том числе завозимых из-за рубежа с присущими им болезнями. Какие-то из этих болезней ранее не регистрировались в нашей стране, какие-то стали забыты за давностью их проявления. Одна из таких болезней - казеозный лимфаденит, с которым авторам довелось столкнуться и диагностировать на одной из козоводческих ферм.
Казеозный лимфаденит (псевдотубер-кулез овец и коз) - хроническая болезнь, вызываемая бактерией Corynebacterium pseudotuberculosis, характеризующаяся обра-зованием воспалительных очагов в лимфоузлах, легких, почках и других органах.
Возбудитель попадает в организм вос-приимчивых животных через поврежденную кожу, слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта и реже через дыхательные пути. С. pseudotuberculosis продуцирует фермент фосфолипазу D. Фермент позволяет бактерии «выживать» в макрофагах, что в свою очередь приводит к пролиферации последних и образованию узелков, подобных туберкулам [6].
Болезнь нередко протекает доброкаче-ственно лишь с изменениями в лимфоузлах, однако имеют место и случаи заболевания с летальным исходом. Более того, судя по ли-тературным данным [1], в отличие от овец, у коз часто в инфекционный процесс вовле-кается вымя. А эта особенность казеозного лимфаденита ставит под угрозу молочную продуктивность стада. В силу вышеизложенного наша статья видится полезной для всех, кто содержит коз, работает с ними, обеспечивает благополучие ферм и хозяйств.
Цель данной работы - ознакомить чита-телей с результатами диагностических ис-следований и, главное, показать характерные патологоанатомические изменения при казе-озном лимфадените, что может быть подспорьем в совершенствовании дифференциальной диагностики болезней коз.
Материалы и методы исследования
Объектами исследования были 16 коз в возрасте 2-3 года с клиническими признаками казеозного лимфаденита. Материалом для патологоанатомического, гистологического и бактериологического исследований послужили органы 2 коз (из 16 вышеупомянутых), отобранные на бойне.
Патологоанатомическое исследование проводили по методу Г. В. Шора, описан-ному в статье [2]. При этом отобран патологический материал для гистологического и бактериологического исследований. Для гистологического исследования образцы лимфатических узлов, легких и вымени (молочной железы) фиксировали в 10 % растворе формалина. В последующем были изготовлены препараты из гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином. Фотографии гистологических срезов вы-полнили при помощи цифровой камеры LevenhukC510.
Для бактериологического исследования в пробирки со средой Эймса асептически отбирали пробы содержимого измененных лимфатических узлов. Посев проводили на пептонную воду, среду Китта - Тароцци, мя-со-пептонный агар (МПА) с содержанием 5 % крови, среду Эндо, желточно-солевой агар, энтерококк-агар, а также на агар Biggy. Идентификацию микроорганизмов про-водили согласно определителю бактерий Берджи [3]. Дополнительные исследования были проведены на анализаторе Bruker Daltonik MALDI Biotyper (метод масс-спектрометрии) и с использованием тест-системы для идентификации коринебактерий (производства НПО «Диагностические системы»). Чувствительность Corynebacterium pseudotuberculosis к антимикробным препа-ратам определяли методом дисков.
Результаты исследования и обсуждение
При клиническом осмотре у всех 16 коз обнаружили увеличение поверхностных шейных, надколенных (коленной складки) и поверхностных паховых лимфоузлов. Увеличенные лимфоузлы заметно выступают на поверхности тела (рис. 1, 2), имеют шаровидную форму, диаметр 4-6 см, пальпируются как плотные, безболезненные образования, не спаянные с кожей.
Наряду с лимфоузлами у коз изменено и вымя: оно увеличено в объеме, бугристое (рис. 3,4). При пальпации вымени животные беспокоятся, при сдаивании выделяется молоко с творожистыми частицами.
В целом общее состояние коз удовлетво-рительное, аппетит сохранен.
При послеубойном патологоанатом иче-ском исследовании обнаружили изменения в лимфоузлах, молочной железе и легких.
Лимфоузлы: после разреза поверхност-ных шейных, надколенных (коленной складки) и поверхностных паховых лимфоузлов, увеличенных в размере, обнаружили, что ткани узлов, за исключением правого надколенного у одной из коз (сочного, красновато-серого цвета на разрезе), замещены мягким, творожистым содержимым серовато-белого цвета, заключенным в довольно толстую, плотную капсулу. Капсула - однородная, белого цвета, слегка стекловидная, очевидно, в силу гиалиноза. Содержимое узлов легко удаляется, оставляя почти гладкую внутреннюю поверхность капсулы (рис. 5, 6).
Молочная железа: на разрезе видны многочисленные гнойные очаги - округлые об-разования различной величины, от 0,5 до 3 см, содержащие густую белую однородную массу (рис. 7). Большинство очагов окружено толстой плотной капсулой.
Легкие: орган имеет обычный вид и консистенцию, за исключением наличия единичных округлых желтовато-белых очажков диаметром до 1 см, видимых с поверхности, под плеврой (рис. 8). Очажки - плотные на ощупь, на разрезе желтовато-белые, однородные.
В результате гистологического исследования установили: в гистологических срезах правого надколенного лимфоузла у одной из коз (сочного, красновато-серого на разрезе) -обильная инфильтрация нейтрофилами и макрофагами (рис. 9), со скоплениями ней-трофилов в лимфоидных узелках (рис. 10). Гистологическое исследование других лимфоузлов сочли нецелесообразным, так как макроскопические изменения указывают на отсутствие в них каких-либо структурных элементов, не считая фиброзной капсулы и творожистого содержимого.
Взамен провели цитологическое исследование мазков творожистого содержимого лимфоузлов с использованием окраски гематоксилином и эозином. В мазках найдены нейтрофилы (в основном), макрофаги, эозинофильный детрит и темно-фиолетовые, окрашенные гематоксилином фрагменты клеточных ядер.
В участках молочной железы, где нет гнойников, в одних альвеолах обнаружили относительно малочисленные скопления нейтрофилов (рис. 11), в других же - много-численные нейтрофилы, макрофаги и фрагменты клеток, подвергнувшихся некрозу (рис. 12).
В гистологических срезах легких обнаружили очаги воспаления со скоплениями лейкоцитов при большой доле макрофагов (рис. 13), а также некротический детрит (рис. 14).
При учете результатов бактериологического исследования содержимого измененных лимфоузлов на МПА с содержанием 5 % крови был отмечен массивный рост однотипных колоний, что позволило сделать предположение о том, что данный микроорганизм является возбудителем инфекции. На остальных плотных питательных средах и на среде Китта - Тароцци рост был незначительным или отсутствовал.
Выделенный микроорганизм рос на МПА с кровью в виде мелких полупрозрачных вы-пуклых колоний с матовой поверхностью. При микроскопическом исследовании об-наружили грамположительные короткие палочки, располагающиеся одиночно, попарно в виде буквы V или в виде «частокола» из нескольких параллельно лежащих клеток, что свидетельствовало о принадлежности данного микроорганизма к роду Corynebacterium.
Дополнительные исследования позволили отнести выделенный микроорганизм к виду Corynebacterium pseudotuberculosis.
Бактерии С. pseudotuberculosis были чувствительны к эритромицину, пенициллину, цефтриаксону, меропенему и устойчивы к цефтазидиму.
Известно [4], что С. pseudotuberculosis заразен не только для животных многих видов, но и для человека, причиняя грануле-матозное воспаление лимфоузлов и других органов. Более того, отмечены случаи заражения С. pseudotuberculosis людей при употреблении сырого козьего молока и сыра [1, 7]. Эти обстоятельства выводят диагностику и дифференциальную диагностику казеозно-го лимфаденита в ряд весьма важных мероприятий в ветеринарном обслуживании коз, в особенности лактирующих. Надеемся, что результаты нашей работы будут полезны в диагностической практике.
Выводы
1. При казеозном лимфадените коз в инфекционный процесс вовлечены главным образом и в равной степени лимфатические узлы и вымя.
2. Воспаление охватывает поверхностные шейные, надколенные и поверхностные паховые лимфоузлы, проявляясь в сильном увеличении и творожистом распаде ткани узлов.
3. В вымени развивается абсцедирующий мастит.
4. В очагах воспаления преобладает лейкоцитарный экссудат, в основном состоящий из нейтрофилов и макрофагов.
5. Результаты исследования применимы в диагностике и дифференциальной диагностике болезней коз.
Список литературы
1. Кузьмин, В. А. Псевдотуберкулез. Инфекци-онные болезни животных [Текст] / В. А. Кузьмин, Ю. Ю. Данко, Т. М. Киндрас ; под ред. А. А. Кудря-шова, А. В. Святковского. - СПб. : Лань, 2007. — С. 96-100.
2. Кудряшов, А. А. Патологоанатомическое вскрытие трупов животных. - Часть 2. Техника исследования отдельных органов [Текст] / А. А. Кудряшов // Ветеринарная практика. - 2005, 1 (28). - С. 33-37.
3. Определитель бактерий Берджи [Текст]. — 9-е изд. - М. : Мир, 1997 - 800 с.
4. Трофимов, И. Г. Казеозный лимфаденит (псевдотуберкулез) овец [Текст] / И. Г. Трофимов, Н. М. Колычев. - Омск : Омский ГИВМ, 1993. - 213 с.
5. Holt, H. Corinebacterium isolated from skin lesions in monkeys [Текст] / H. Holt, A. Goffe // Vet. Bull. - 1961, 31, 5.-P. 241.
6. Jones, T. Ovine caseous lymphadenitis (Pseudotuberculosis of sheep and goats) [Текст] / . Jones, R. Hunt, N. King // Veterinary Pathology. - 6th ed. - Baltimore, Maryland : Williams & Wilkins, 1997. - P. 481-482.
7. Jubb, K. Mastitis in sheep and goats [Текст] // К. Jubb, P. Kennedy, N. Palmer // Pathology of Domestic Animals. - 4th ed. - 1993, Vol. 3. -San Diego, California: Academic Press, Inc. - P. 466-467.