В наши дни известно большое количество заболеваний, при которых данные биохимических исследований, выясняющие патогенетическое значение нарушений биохимических процессов, превратились из вспомогательных в главные опорные пункты при постановке диагноза. К числу таких заболеваний следует отнести острые заболевания печени, почек, поджелудочной железы, авитаминозы, интоксикации или острые отравления природными и техногенными ядами, к числу которых относится большая группа микотоксинов, бактериальных токсинов, пестицидов «солей тяжелых металлов» и прочих токсических агентов.
Проведение биохимических исследований с диагностическими целями связаны с решением ряда задач, среди которых главное значение имеют следующие:
1.    Установление показателей биохимического статуса здорового пациента (норма). Необходимо
отметить, что:
1.1.    Отклонения    биохимических    показателей    могут    быть    выявлены    только    при    знании
нормальных величин, характеризующих уровень обмена данного конкретного пациента;
1-2.    Знание   показателей   нормального   биохимического   статуса   должны   являться   основой
применения биохимической диагностики;
1.3.    Вероятно, что при исследовании биохимических показателей следует учитывать климато-
географические особенности и, прежде всего, питание
2.    Выбор для исследования биохимических показателей, нарушение которых могло бы считаться
наиболее специфическими для подтверждения или отрицания предполагаемого диагноза.
2.1.    Биохимические   исследования   используются   либо   для   постановки   диагноза,   либо   для
изучения тяжести или динамики патологического процесса;
2.2.    Выбор   биохимических   показателей   для   исследования   в   каждом      конкретном   случае
опирается на опыт врача-ветеринара.
 
Клиническое значение некоторых биохимических показателей
Белки относятся к высокомолекулярным соединениям, в их состав входит более 20 видов аминокислот. Различают простые и сложные белки. Белки обладают гидрофильными свойствами. Белки выполняют следующие функции: каталитическую, пластическую, транспортную, рецепторную, регулирующую \А т д,
Показатели белкового обмена -   общий белок, альбумины Концентрация    общего    белка    определяет    коллоидно-осмотическое    давление    плазмы     На
концентрацию белка в плазме влияют питание, функция почек и печени,   метаболические нарушения.
Изменения в соотношении белковых фракций могут свидетельствовать об определенных заболеваниях.
Концентрация общего белка в сыворотке зависит от синтеза и распада альбуминов и глобулинов Белки
сыворотки     транспортируют многие вещества, обеспечивают иммунологическую сопротивляемость и
воспалительную реакцию
Альбумины   -   истинной   гиперальбуминемиии,   обусловленной   естественными   причинами   не
существует  Любая ситуация, приводящая к   снижению воды в плазме, повышает концентрацию всех
белков плазмы, включая альбумины   Гипоальбуминемия -   острые    и    хронические воспалительные
процессы, некроз ткани (злокачественные процессы).
Показатели активности ферментов сыворотки крови
В основе многих болезней лежат нарушения нормального функционирования ферментативных процессов. Изменения в специфических ферментативных реакциях можно идентифицировать как причину или следствие различных патологических состояний. Эта взаимосвязь наиболее отчетливо выявляется при некоторых врожденных нарушениях метаболизма. Изменение активности ферментов в биологических жидкостях при заболеваниях могут быть обусловлены рядом причин
Амилаза в норме присутствует в сыворотке крови в небольших количествах. Она образуется в поджелудочной и слюнных железах. Воспаление этих желез или закупорка их протоков приводит к поступлению в кровь больших количеств фермента. Повышение амилазы имеет место при остром панкреатите, при закупорке протока поджелудочной железы. Снижение показателя - при остром и хроническом гепатите.
Аминотрансферазы ACT и АЛТ (трансаминазы) сыворотки - это внутриклеточные ферменты, участвующие в обмене аминокислот и углеводов В высоких концентрациях содержатся в печени, мышцах, мозге Увеличение концентрации этих ферментов в сыворотке крови свидетельствует о некрозе или поражении прежде всего этих тканей
Щелочная фосфатаза присутствует в высокой концентрации в растущих костях, в желчи. Повышение уровня этого фермента - при костных заболеваниях, опухолях костей, при закупорке желчных протоков (внутри- и внепеченочных) камнем, спайками, опухолью, заболевания печени.
Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) - фермент обнаруживается во всех клетках и жидкостях. Повышение имеет место при некрозе тканей, характерно для острой фазы инфекционного гепатита
Гамма-глутамилтрансфераза - активность фермента в сыворотке повышается при заболеваниях поджелудочной железы. Наиболее высокая активность ГТФ отмечается при закупорке желчных протоков и других холестатических состояниях. ГТФ особенно чувствительна к гепатотоксическим воздействиям.
Показатели обмена углеводов
Глюкоза - в норме концентрация глюкозы во внеклеточной жидкости строго регулируется так, чтобы она, как источник энергии, была доступна тканям, но при этом не экскретировалась с мочой. Неспецифические симптомы нарушения метаболизма глюкозы - гипогликемия и гипергликемия. Гипергликемия - физиологические (эмоции, шок), заболевания поджелудочной железы (острый и хронический панкреатит).
Показатели обмена небелковых азотистых соединений
Мочевина - синтез мочевины происходит в печени. Увеличение содержания мочевины в сыворотке крови является одним из главных признаков нарушения функции почек, Повышение уровня мочевины в сыворотке может носить и внепочечный характер: при потере жидкости (обезвоживание, рвота, понос). Уменьшение содержания мочевины - при заболеваниях печени (из-за нарушения синтеза мочевины в печени)
Креатинин - определение креатинина в сыворотке крови проводят при заболеваниях почек. Повышение показателя имеет место при острой и хронической почечной недостаточности, закупорке мочевыводящих путей и нарушении функции почек, вызванном некоторыми лекарственными препаратами Снижение показателя ниже нормы пока не получило объяснения.
 
Показатели липидного обмена
Холестерин - компонент липидного обмена, имеющий наибольшее клиническое значение Находится в крови в свободном и связанном с другими веществами состоянии. Концентрац/= холестерина зависит от его метаболизма, на который влияют питание, эндокринные железы .• состояние внутренних органов (печень, почки). Содержание в крови зависит от возраста.
Показатели обмена макроэлементов
Кальций - на содержание кальция в сыворотке и других жидкостях организма влияют питание состояние эндокринной системы, почек, желудочно-кишечного тракта. Для интерпретации результатов необходимо также определять концентрацию альбумина в сыворотке, т.к. часть кальция находится в связанном с белками плазмы состоянии.
Магний - внутриклеточный электролит. Внеклеточно он способствует нервно-мышечному возбуждению. Низкий уровень магния в плазме приводит к тетании, слабости, сонливости, дезориентации. Повышение магния - при почечной недостаточности. Снижение - при хронической диарее, голодании, хроническом гепатите.
Фосфор - на концентрацию неорганического фосфора в сыворотке влияют функция паращитовидных желез, витамин Д, всасывание в кишечнике, функция почек, метаболизм костной ткани и питание. Повышение - при почечной недостаточности, гипервитаминоэе. Снижение - гиповитаминоз Д. при нарушении кишечного всасывания.
Использование автоматических биохимических анализаторов в клинической ветеринарной
биохимии
Оснащение ветеринарных лабораторий современными биохимическими анализаторами позволяет решить проблему изучения биохимического статуса животных и птиц. В настоящее время исследования крови сельскохозяйственных животных часто ограничиваются пятью-семью показателями, такими как общий белок. Са. Р, резервная щелочность, каротин, белковые фракции, витамин А, хотя еще в 70-х годах были разработаны нормы биохимических показателей (ферменты, субстраты, электролиты и др.). Для домашних животных ограничением служит еще и то, что забор крови часто ограничен 2-5 мл крови, что недостаточно для использования стандартных макрометодик.
В последние три-пять лет в практике ветеринарных клиник, работающих с домашними животными., появились ручные (фотометры), полуавтоматические и автоматические медицинские биохимические анализаторы Однако зачастую образцы сыворотки крови просто посылают в медицинские учреждения (поликлиники, лаборатории), которые не имеют ни лицензии на ветеринарную деятельность, ни специалистов, имеющих опыт работы и знающих видовую и даже породную специфику животных.
Одной из задач, поставленных два года назад при создании нашей ветеринарной лаборатории, было обеспечение высокого уровня биохимического контроля физиологического состояния животных и птицы наших клиентов. Выбор импортных медицинских анализаторов, представленных на Российском рынке, достаточно широк, от сравнительно дешевых фотометров, позволяющих работать только в ручном режиме, до сложных и дорогостоящих автоматических анализаторов. При выборе прибора мы обращали внимание еще как на доступность наборов для анализа, так и способность оборудования работать с наборами реактивов разных производителей (так называемые открытые системы)
Выбранный нами «A1RONE - 200» - полный автомат (открытая система), высоко технологичный, с современной механикой и электроникой, анализатор для клинической биохимии. Использование дружественной среды программирования и высокая рабочая эффективность делают его идеальным для любой лаборатории с потоком 5 -30 образцов в день.
После полугодового тестирования биохимических наборов различных зарубежных и отечественных производителей мы остановили свой выбор на реактивах фирмы «BIOCON» Германия. Теперь все биохимические исследования выполняются с использованием только высококачественных реактивов этой фирмы, включая «мультикалибратор», «нормальную» и «патологическую» сыворотки как стандарты при калибровке прибора. Успешно решен вопрос микро- и полумикрометодов для исследования образцов (сыворотки крови) - для исследования на двадцать биохимических показателей достаточно 0,5 мл сыворотки крови.
За год работы биохимического анализатора в нашей лаборатории проведено около 10 тысяч исследований сывороток крови кошек, собак, лошадей, свиней, птицы. В Приложении 1 представлена реальная экспертиза 24 образцов сыворотки крови лошадей.
 
Приложение 1
Результаты биохимических исследований сывороток крови лошадей

Сыворотка Лошадей    Общий Бил-н    Прямой бил-н    АЛ
Т    АС
Т    Щ.Ф,    Глюко-За    Моче-Вина    Креа-Тинин    Общ
Бело к    Холес-Терин    Фос-фор
    М км оль/ Л    Мкмоль/ Л    U/I    U/I    U/I    Ммоль Л    Ммол ь/ Л    Мкмол ь/
Л    Г/л    Ммоль л    Ммоль
л
1    35,5    5,6    12    569    702    4,6    5,35    120    60    2.1    0,81
2    35,3    6,4    13    351    424    5,1    5,1    162    72    2,0    0,55
3    34,7    6,0    11    384    384    4,7    5.1    104    59    2,45    0,57
4    44,0    6,5    12    566    502    5,5    8.2    197    74    2.45    0,51
5    48,1    7.1    17    107 4    542    5.7    8,15    184    70    2,65    1.11
6    40,2    6,85    13    415    292    4,7    5,0    113    63    2,74    0,77
7    37,0    6,25    24    282    413    I     3,8    5,1    116    57    1,61    1,03
8    35,4    5,7    10    194    315    3,9    5,4    107    54    1,97    0,78
9    24,0    3,9    8    529    326    5.0    4,1    107    70    2,9    0.62
10    19,2    3,3    7    124    219    2,5    5,4    107    46    1.5    0,52
11    26,6    2,4    5    166    220    3,4    5.1    111    55    1.9    0,60
12    30,0    1,36    16    204    830    4.1    8,6    167    70    2,4    0,74
13    39,3    7,3    19    807    720    5,6    6.5    113    66    2,2    1,03
14    30,2    6.4    8    313    267    5,2    5,7    143    67    2,1    1.16
15    31,7    7,1    11    316    264    5,3    5.0    115    67    2,7    1.0
16    42,6    6.9    11    396    259    5,4    5,7    182    74    2,4    L   0.89
17    50,7    8.5    12    720    373    5,1    7.4    174    73    2,9    0,79
18    34,4    7,3    11    372    250    5,5    4,95    95    65    2,7    1.17
19    52,4    8,1    9    318    315    3,6    6,5    156    82    2,25    1,35
20    38,0    6,7    7    226    265    5.5    5.7    109    65    2,4    1.2
21    34,4    6,4    19    458    229    5,2    4.4    116    68    2,5    1.0
22    31,5    6,0    7    195    165    5.2    6.4    118    70    2,4    1.1
23    27,1    6,4    7    196    277    4,5    7.0    150    76    2.1    1.0
24    33,7    6.4    5    201    583    4.6    9.0    147    81    2.3    1,05
Приложение 2
Нормы для биохимических показателей сыворотки крови лошадей

Наименование    Ед. изм,    Норма
Глюкоза    М моль/л    4,1-6,4
Белок    Г/л    62-79
Альбумин    Г/л    26-37
Холестерин    М моль/л    1,9-3,9
Билирубин   общий    Мкмол ь/л    3,4-34,2(51,4)
Билирубин   прямой    Мкмол ь/л    0-8,55
Аланинаминотрансфераза    U/л    34-113
Аспартатаминотрансфераза    U/л    226 - 366
Лактатдегидрогеназа    U/л    162-412
Щелочная фосфатаза    U/л    143-395
Гамма-глутамилтрансфераза    U/л    4-13,4
Амилаза    U/л    35-100
Мочевина    Ммол ь/л    3,6-8,6
Креатинин    Мкмол ь/л    106-168
Фосфор неорганический    Ммол ь/л    1
Кальций    Ммол ь/л    2,8
Магний    Ммол ь/л    0,82-1,23
Мочевая кислота    Ммол ь/л    нет данных
Триглицериды    Ммол ь/л    нет данных

 
На основании годового опыта работы, а также используя отечественную и зарубежную литературу, список которой приведен ниже, было сделано следующее:
1.    Отработаны режимы работы прибора (константы, объемы используемых реактивов и сывороток,
время инкубации и др.).
2.    Составлены нормы для различных видов животных (см. Приложение 2 «Нормы для биохимических
показателей сыворотки крови лошадей»).
3.    Составлены  «профили»  (набор  необходимых  исследований)  для   разных  видов  патологий  (см.
Приложение 3).
Приложение 3
Профили лабораторных биохимических исследований в сыворотке крови животных
ПОЧЕЧНАЯ ПАТОЛОГИЯ
1.   Общий белок

2.    Альбумины
3.    Мочевина
4.    Креатинин
5.    Мочевая кислота
6.    Кальций
7.    Магний
8.    Фосфор
9.    Глюкоза
10.    Холестерин
11.    лдг
ПЕЧЕНОЧНАЯ ПАТОЛОГИЯ
1.    Общий билирубин
2.    Прямой билирубин
3.    Аланиновая трэнсаминазэ (АЛТ)
4.    Аспарагиновая трансаминэза (ACT)
5.    Щелочная фосфатаза
6.    Гамма-глютамилтрансфераза (ГТФ)
7.    Общий белок
8.    Альбумин
9.    лдг
10.    Холестерин
11.    Глюкоза