Х.З. ГАФФАРОВ, А.В. ИВАНОВ, Л.В. ВАЛЕБНАЯ, Г.Н. СПИРИДОНОВ, Л.Ш. ДУПЛЕВА, М.А. ЕФИМОВА
Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных (ФЦТРБ-ВНИВИ)
Инфекционный кератоконъюнктивит (ИКК) крупного рогатого скота широко распространен во многих странах мира. В Российской Федерации болезнь чаще всего регистрируют среди молодняка текущего года рождения и содержащегося на откормочных площадках с высокой плотностью поголовья.
В настоящее время в мире считают, что возбудителем ИКК крупного рогатого скота являются бактерии Moraxella bovis [2, 5, 7, 9, 12]. Герпесвирус типа I крупного рогатого скота также может вызывать острый конъюнктивит. При этом воспалительный процесс не прогрессирует до изъязвления роговицы. Высказано мнение, что герпесвирус типа I создает особо благоприятную среду для патогенного действия возбудителя ИКК [3,4, 11]. Другие исследователи считают, что при ИКК крупного рогатого скота определенную роль могут играть хламидии [14], Мусоplasma bovoculi [8] и условно патогенные бактерии, которые в некоторых случаях участвуют в формировании смешанных инфекций [13].
Большое значение в возникновении массовых кератоконъюнктивитов у крупного рогатого скота придается и гельминтам, в частности нематодам из рода Thelazia Bosc, которые, находясь в глазу, оказывают на него механическое и токсическое раздражающее действие с последующим поражением большей части поверхности роговицы.
Отсутствие нормативных документов по мерам борьбы и ликвидации этой контагиозной болезни, завоз племенного крупного рогатого скота из стран Западной Европы, наличие скрытых носителей возбудителя, все это привело к появлению стационарно неблагополучных по ИКК очагов.
Цель данной работы - обобщить результаты исследований клинико-эпизоотологических особенностей, этиологических аспектов и патогенеза ИКК крупного рогатого скота в регионе Среднего Поволжья и Преду рал ья РФ.
Впервые ИКК крупного рогатого скота зарегистрировали в июле - августе 1997 г. в одном из животноводческих комплексов Республики Татарстан. Болезнь носила массовый характер и проявлялась вначале отечностью конъюнктивы и слезотечением, а в дальнейшем - помутнением роговицы и развитием эрозии.
Клинико-эпизоотологический мониторинг ИКК, осуществленный в 1998 - 2003 гг. в 48 хозяйствах 12 районов Республики Татарстан и 29 хозяйствах 8 районов Республики Башкортостан и Удмуртии показал, что заболеваемость телят 1 - 5-месячного возраста в расчете на 100 тыс. гол. составляла 0,5 - 0,85, у молодняка старшего возраста - 0,2 - 0,25 и среди дойного стада она колебалась в пределах 0,12 - 0,15. В больших стадах болезнь наносила значительный экономический ущерб скотоводству вследствие снижения удоя до 50 % и прироста массы тела на 31 - 37%, реже - падежа, а также затрат на проведение ветеринарно-санитарных и лечебно-профилактических мероприятий.
Возбудитель инфекции распространялся при непосредственном контакте больных животных со здоровыми, а также через переносчиков - мух и других летающих насекомых. Вспомогательными факторами, влияющими на возникновение энзоотии, могли быть травмы глаз, сухая жаркая погода, ветер и пыль. Болезнь начиналась весной, достигая максимума в июле - августе, и постепенно уменьшалась к концу октября. Причем интенсивность эпизоотического процесса зависела от возраста и степени облучения животных в летние месяцы экстремальным потоком солнечных УФ-лучей, чем она больше, тем тяжелее протекала инфекция (рис. 1).
Рис. 1. Сезонные изменения интенсивности эпизоотического процесса при инфекционном кератоконъюнктивите крупного рогатого скота, вызываемого бактериями Moraxella bovis: 1 -до 6 мес; 2 -от 6 до 12 мес; 3 - взрослое поголовье
При клиническом осмотре больных животных наблюдали отечность век, конъюнктивит и слезотечение. Затем появлялось истечение из медиального угла глаз серозного, серозно-слизистого, а несколько позже гнойного экссудата. Зрение ослабевало, животные искали темное и прохладное место. Из-за снижения потребления корма и воды они худели. При пальпации выявляли болезненность век, повышение местной температуры. Припухшая, влажная и блестящая конъюнктива краснела. Через 24 - 72 ч на
Рис. 2. Глаз больного теленка, пораженный бактериями Moraxella bovis, на стадии изъязвления и васкуляризации
роговице образовывалось помутнение молочно-белого цвета, распространяясь либо диффузно по всей поверхности, либо начиная с центра. В некоторых случаях поражения конъюнктивы были незначительными и на первый план выступали изменения со стороны роговицы. Вследствие распада клеток последней на 3 -5-й день появлялась эрозия около 1 мм в диаметре. При постоянном воздействии первичных и вторичных факторов эрозия превращалась в язву, которая проникала в слои роговицы, захватывая эпителий, боуменову оболочку и собственное вещество роговицы. Сосудистая сеть сначала появлялась по краю очага поражения, а в особо тяжелых случаях она окружала всю роговицу по периферии. В последующие 10-15 дней сосуды прорастали к центру роговицы и там срастались, образуя яркое сплетение (рис. 2). Эти изменения приводили к утолщению роговицы и потере ее прозрачности. У некоторых особей наблюдали деформацию глазного яблока - кератоглобус или кератоконус из-за увеличения внутриглазного давления. В большинстве случаев эти признаки были менее выраженными, участки поражения в диаметре составляли не более 3-5 мм и заживали без васкуляризации с образованием рубцов на роговице. При благоприятном течении язва постепенно очищалась, полость ее заполнялась грануляциями и через 1,5-3 декады у животных зрение могло восстановиться. Однако нередко помутнение роговицы и изъязвление распространялись до ее собственного вещества и даже сквозь него и десцеметову пластинку. При этом вся роговица перфорировалась и стекловидное тело с хрусталиком вытекали через данное отверстие. Инфекция могла распространиться на зрительный нерв и далее на подпаутинное пространство головного мозга, вызывая в отдельных случаях менингит с летальным исходом.
Гистологические изменения характеризовались острым воспалением. Изъязвленная роговица была утолщена вследствие отека, инфильтрации лейкоцитами и вновь образованными кровеносными сосудами. Эпителий и передняя часть собственной ткани ее находились на разных стадиях распада (рис. 3).
Бактериологически исследовали смывы из конъюнктивальных мешков глаз больных телят в острой стадии болезни. При селекции в кровяной агаровой среде получили культуры микроорганизмов, которые по S-форме колоний и по способности вызывать гемолиз эритроцитов, характеризующей их вирулентность, а также по морфологическим и культуральным свойствам были сходны с возбудителем ИКК. Культуры Moraxella bovis представляли собой короткие толстые с закругленными концами грамотрицательные палочки (длина 1,5-2 мкм, диаметр 0,5 - 1,0 мкм), расположенные парами или в виде коротких цепочек, спор не образовывали, были неподвижны.
Рис. 3. Гистологический срез роговицы глаза теленка, больного инфекционным кератоконъюнктивитом. Разрушение слоев эпителиальных клеток бактериями Moraxella bovis. (x 27600)
На кровяном мясопептонном агаре при рН 7,2 - 7,6 после 24-часового инку-
Рис. 4. Колонии бактерии Moraxella bovis с зоной р-гемолиза на кровяном агаре
бирования при 37 °С бактерии формировали гладкие, круглые, блестящие, серовато-белые колонии диаметром 1,0 - 1,5 мм с зоной р-гемолиза 0,5 - 1,0 мм (рис. 4). Спустя 48 - 72 ч они становились полиморфными, клетки варьировали в размерах и форме, принимая вид нитей и длинных цепочек. Бактерии Moraxella bovis на МПБ через 24 - 48 ч инкубирования в аэробных условиях при 37 °С вызывали помутнение среды с образованием небольшого осадка, не ферментировали сахара, не восстанавливали нитраты, не образовывали индола, разжижали желатину, пептонизировали лакмусовое молоко, реакция на оксидазу была положительной.
При культивировании бактерий на кровяном агаре регистрировали колонии двух типов: гемолитические и негемолитические. Для крупного рогатого скота и лабораторных животных патогенны только гемолитические, которые вызывали гибель белых мышей в течение 24 ч при внутрибрюшинном введении им суточной агаровой культуры в дозе 500 тыс. микробных клеток, что, по-видимому, связано со способностью их синтезировать эндо- и экзотоксины [5, 10].
Результаты сравнительного изучения основных биохимических свойств выделенных микроорганизмов, выявление антигенного родства с референтными штаммами бактерий Moraxella bovis, полученными из Американской национальной коллекции микроорганизмов, позволили идентифицировать их как бактерии Moraxella bovis, относящиеся к семейству Neis-seriaceae. На "Штамм бактерий Moraxella bovis "Г97-ВНИВИ", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота" был выдан патент РФ на изобретение №2145353 (приоритет от 15.09.1998) [1].
Заключение. Культуры Moraxella bovis, выделенные из смывов конъюнктивальных мешков глаз больных телят в острой стадии болезни, могут быть использованы в качестве производственных при изготовлении диагностических и лечебно-профилактических биопрепаратов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гаффаров Х.З. и др. Патент РФ на изобретение "Штамм бактерий Moraxella bovis Т97-ВНИВИ", используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кера-токонъюнктивита крупного рогатого скота" № 2145353 (приоритет от 15.09.1998).
2. Русинов А.Ф. // Информ. бюлл. Укр. акад. аграр наук Ин-т эксперим. клинич. вет. медицины. 1995
3. Штрауб О.Х. Инфекции крупного рогатого скота вызываемые вирусами герпеса. - М : Колос. 1981
4. Abi-nanti F.R. et al. //Am. J. Vet Res. 1961, 22
5 Arora A.K. V Vet. Arhiv, 1982.
6. Barner R.D , Am. J. Vet. Res. 1952, 13.
7. Hughes D. E et al. / J. Amer. Vet. Med. Assoc.1970, 157,
8. Langford E V. et al. // Canad. J. Microbiol. 1973, 19.
9. Pugh G W. et al // Cornell. Vet. J. 1971,61.
10. PughG. W. etal. Can. J. Сотр. Med. 1973, 37 (1).
11 Rebnun W. et al // Corn. Vet. 1978 68.
12. Schmidt V. ,, VEB. Gustav. Fischer. Verlag. Jena, 1973.
13. TravnicekM etal.,/ Vet. Med. Praha. 1982, 27
14 Wehr J. etal. ,/Wis-sensch. Zschr. Humboldt. Univ. Berlin. 1980 29 (1).