Для тканевой терапии и стимуляции организма животных с целью повышения продуктивности в ветеринарной практике могут быть использованы различные органы и ткани животных и некоторые растения. Наиболее часто применяются (как гомогенно, так и гетерогенно) кожа, печень, селезенка, надпочечник, сальник, семенники, мышцы, кости, плацента, эмбриональная ткань, матка, яичники, лимфатические узлы, щитовидная железа и др. Из растительных тканей как источник биогенных стимуляторов применяют листья алоэ, сахарной свеклы и элеутерококка. Источниками биогенных стимуляторов являются также лиманная грязь и торф.
Приготовление тканей для имплантации под кожу. Способ h, II. Филатова, От заведомо здорового молодого животного берут кровь тотчас после убоя (кастрации) в стерильные стеклянные биксы с притертыми пробками, которые ставят в рефрижератор или на ледник при температуре 2—4°. Через 5—7 суток ткань промывают водой, режут на кусочки величиной 4X5 см, которые закргывают в четырехслойные марлевые салфетки и укладывают и металлическую биксу, на дно которой настилают вату. Биксу помещают в автоклав на 1 ч при температуре 120°. После автоклавирования ткань может быть использована в качестве тканевого препарата для имплантаиин под кожу.
Для приготовления ткани впрок кусочки, завернутые в салфетку, помещают во флаконы с притертыми пробками емкостью 50— 100 мл, а затем автоклавируют.
Н. И. Шпак рекомендует консервировать ткани фитонцидами при комнатной температуре. На дно банки емкостью 2 л с притерши пробжой или эксикатора помещают 20 г толченого лука, который покрывают сеткой, а на сетку ложат кусочки ткани. Банку накрывают пробкой. Ткань выдерживают в течение 7 суток, затем интоклавируют 30 мин при давлении 1,5 атм.
Способ И. И. Краузе. Для приготовления тканевого препарата берут кожу или другие ткани от только что убитых животных. Ткань разрезают на небольшие кусочки и помещают в банку с 2-ироцентным раствором хлорацида. Ткани консервируют в течение 4—5 суток, ежедневно сменяя раствор. Плаценту перед кои-серпапией отмывают водой от крови и загрязнений.
R растворе хлорацида ткани могут сохраняться до 6 мес. не теряя терапевтических качеств. Как указывает Краузе, обработанные хлором ткани теряют видовую специфичность и при подсадке мо лают аллергической реакции.
Раствор хлорацида для консервирования тканей можно заменял. 2-процентным раствором хлорамина.
Ткани, консервированные в 2-процентном растворе хлорацида или хлорамина, применяют в виде аппликаций при лечении ран и я.чп.
После предварительной обработки раны (язв) на ее поверх-ность накладывают консервированный кусочек кожи, оболочки шыценты или другой ткани и удерживают ватно-марлевой слегка длиящеЙ повязкой. Кусочек меняют через 3—5 суток. Грануляционная ткань быстро ассимилирует питательные вещества кусочков 1КЛПИ. В ране возбуждаются регенеративные процессы, она выполняется здоровой грануляционной тканью и быстрее наступает рост эпидермиса и заживление.
Перед подсадкой под кожу обработанные хлорацидом ткани отмывают от хлорацида в стерильном физиологическом растворе.
Способ И. С. Харченко. Приготовление ткани для имплантации основано на дегидратации органа или ткани путем пропускания через сосудистую систему воздуха, нагретого до температуры 37— 38°. Органы помещают в камеру при температуре 40°; через главную артерию с помощью компрессора нагнетают воздух, который проходит через всю капиллярную сеть и выходит через вену. За 5—6 к орган высыхает. Кусочки этого органа весом 0,01—0,08 г помещают в ампулы и стерилизуют в автоклаве при температуре 120° в течение 1 ч.
Перед подсадкой кусочки сухой ткани опускают на 6—8 мин в теплый стерильный физиологический раствор.
При таком способе в тканях и органах сохраняются в большем количестве биологически активные вещества, гормоны, ферменты, витамины. Активность тканей сохраняется до двух и больше лет.
Приготовление тканевых препаратов для подкожных инъекций. Приготовление экстрактов из тканей животных по В. П. Филатову. Консервированную в условиях пониженной температуры ткань измельчают в гомогенизаторе с постепенным добавлением физиологического раствора в соотношении 5 : 10. Приготовленную массу оставляют на 2 ч при комнатной температуре, затем на 30 мин ставят на водяную баню при температуре 60—80° и в течение 2— 3 мин кипятят. Потом массу последовательно фильтруют через 2 слоя марли, вату и фильтровальную бумагу. Фильтрат разливают в ампулы (флаконы) п автоклавируют 1 час при температуре 120°.
Приготовление экстрактов из листьев алоэ, свеклы и других растений. Листья растений помещают в пакеты из черной бумаги и сохраняют в темном помещении при температуре 6—8° 12—15 суток. После консервирования листья взвешивают, моют полой, измельчают в мясорубке и заливают дистиллированной водой или физраствором (на 1 г листьев 4 мл физраствора). Массу настаивают 2—3 ч при комнатной температуре, затем I ч выдерживают на водяной бане и кипятят в течение 2—3 мин. Фильтруют через ватный и бумажный фильтры. Фильтрат разливают в ампулы (флаконы) и автоклавпруют 1 ч при температуре 120°,
Приготовленные таким способом экстракты из тканей животного и растительного происхождения можно применять с лечебной целью для подкожного введения, для орошения ран и язв, введения в конъюнктивальный мешок, аппликации смоченных в них салфеток на поверхность язв, ран и др.
Экстракты в ампулах или флаконах при хранении в прохлад-ном месте сохраняют свою активность до года и больше.
Приготовление тканевых взвесей. В 1949 г. мы приготовили препараты в виде тканевых взвесей, которые легко можно вводить в организм с помощью обычного шприца. При этом был сохранен принцип консервирования тканей по В. П. Филатову.
Тканевые взвеси лучше приготовлять из паренхиматозных органов (печень, селезенка, семенники, почки, надпочечники, щитовидная железа и др.) или эмбрионов животных, которые легко поддаются, обработке и обладают высокой биологической активностью. „'После пятисуточного консервирования при температуре 2—4° ткань промывают кипяченой водой, взвешивают, измельчают в стерильной мясорубке и дополнительно тщательно растирают в гомогенизаторе при постепенном добавлении физиологического раствора (на 1 г ткани 2—3 мл раствора). Приготовленную таким способом массу оставляют на 2 ч при комнатной температуре, а затем на 30 мин ставят на водяную баню при температуре 60—80°. После этого массу фильтруют через 2—3 слоя стерильной марли (или мелкопетлистое сито) и фильтрат разливают в ампулы или флаконы. Ампулы запаивают, а флаконы закрывают пробками и автоклавируют 1 ч при температуре 120°.
В проавтоклавированных ампулах (флаконах) содержимое со-стоит из двух слоев: до половины, на дне, находится тонкая тканевая взвесь» а над пей — прозрачный экстракт. При встряхивании ампулы содержимое принимает вид равномерной тканевой взвеси, которая свободно набирается шприцем через иглу 1,5—2 мм в диаметре. Тканевая взвесь сохраняет биологическую активность в сухом месте при температуре 6—8° в течение 3 лет и больше. Ее легко дозировать и можно транспортировать на дальние расстояния.
Тканевую взвесь можно готовить из одного органа (ткани) или из нескольких, беря их в определенных соотношениях.
В. П, Багинскас (I960) разработал методику приготовления тканевой взвеси из селезенки (89%), печени (10%) и надпочечников (1%) крупного рогатого скота.
Физикохимические показатели этой взвеси: рН 5,6—6,5, сухого вещества в прозрачной части не менее 2,3%, натрия хлорида 0,7— 0,9%, остаточного азота в прозрачной части не менее 0,21%, активность по дрожжевому тесту не менее 200%.
А. П. Карасев и Е. Ф. Дымко (1958) рекомендуют готовить тканевую взвесь из печени, селезенки и лимфатических узлов крупного рогатого скота, взятых в весовом соотношении 4:2:1.
И. С. Нагорный (1969) рекомендует ткани после 5—7-дневной консервации при температуре 2—4° измельчать на кусочки размером 2X2 см, складывать в эмалированную кастрюлю, заливать физраствором в соотношении 1 : 2 и кипятить 40 мин. Затем ткань измельчают в гомогенизаторе и протирают через густое сито вместе с бульоном. Полученную массу тщательно перемешивают, разливают по флаконам и автоклавируют при температуре 110—120° 50—60 мин.
Тканевая взвесь, приготовленная по нашей технологии, получила широкое распространение в ветеринарии и животноводстве. Однако эта взвесь оказывает действие в течение 10—18 суток. М. А. Макаров (1960) предложил для пролонгирующего действия во время изготовления взвеси добавлять 0,1—0,2% агар-агара.
Н. П. Тихомиров (1972) считает, что при современной технологии приготовления тканевых взвесей происходит денатурация белковых веществ, разрушаются витамины, гормоны, ферменты, иммунные тела, аминокислоты и, возможно, другие биологически активные компоненты, что снижает биологическую активность тканевых препаратов. Автор предлагает дробную пастеризацию в аппарате Коха в течение 40 мин ежедневно 3 дня подряд при температуре 65°.
Приготовление взвеси из кости по Л. И. Юрченко (1970). Для приготовления тканевого препарата из кости от заведомо здорового животного (крупный рогатый скот) после убоя берут эпифизы трубчатых костей и консервируют при температуре 2—4° в течение четырех суток. Затем кости автоклавируют при 4 ат в течение 3 ч, после чего высушивают в сушильном шкафу при температуре 70—100° в течение двух суток, измельчают в шаровой мельнице до тонкого порошкообразного состояния и просеивают через густое сито. Полученную костную муку таким образом смешивают с 0,2-процентным раствором агар-агара в соотношении 1 : 2, разливают во флаконы с притертыми пробками и автоклавируют а течение 1 ч при 120°.
Тканевая взвесь из кости, влияя на организм в целом, является эффективным лечебным препаратом при многих заболеваниях животных хирургического характера и стимулятором физиологических функций организма здоровых животных.
Препарат оказывает стимулирующее действие на организм животных при парентеральном введении в дозе 0,05—0,1 мл на 1 кг веса с интервалом между повторными введениями 30 дней.
Приготовление взвеси из икры рыб. Для тканевой терапии используется икра, которая содержит много биологически активных веществ.
Извлеченную из рыб (муксунов, щук и др.) икру помещают в стерильную банку с притертой пробкой и ставят в рефрижератор при температуре 2—6G на шесть — восемь суток. Консервированную икру растирают в стерильной ступке при постепенном добавлении физраствора в соотношении 1:2. Взвесь процеживают через два слоя марли, разливают по флаконам и автоклавируют 10 мин при температуре 120°. Флаконы закрывают пробками и заливают парафином. Взвесь сохраняет биологическую активность б—б мес. Препарат вводят под кожу в дозе 10—40 мл. Повторные шнгдения явлений анафилаксии не вызывают.
Приготовление тканевых препаратов для наружного применения. Приготовление мазей из тканей. Мази можно готовить из различных консервированных на холоде тканей. Наиболее эффективным терапевтическим действием обладают мази, приготовленные из эмбриональных тканей. Как установлено исследованиями, эмбриональный материал богат раневыми гормонами (протеазами, глютатионами, нуклеиновыми кислотами), которым придается важное значение в процессе регенерации и бластоматозного роста. В ветеринарной практике применяют мазь, приготовленную по Д. И. Гольдбергу (1942).
Для ее изготовления в асептических условиях берут 5—6-ме-сячные плоды крупного рогатого скота и 2—3-месячные мелкого рогатого скота от заведомо здоровых животных в период убоя.
Плод измельчают в стерильной мясорубке, полученный фарш тщательно растирают в стерильной фарфоровой ступке с после-дующим добавлением к 250—300 г тканевой массы 5 г ксероформа или 15 г белого стрептоцида и 700 г белого вазелина. Все ингредиенты тщательно растирают в ступке до однообразной консистенции. Готовую мазь сохраняют в стерильных закрытых банках емкостью 100—150 мл в условиях пониженной температуры.
Применяют при лечении ран и язв.
Тканевая мазь по П. Ф. Симбирцеву (1955). В состав этой мази входят 90—95 г тканевого фарша из семенников и 5^-10 г дихлорамина Б. Семенники берут во время кастрации или убоя молодых животных, тщательно отмывают от крови и консервируют и 2-процентном растворе хлорацида в течение 10 дней. Затем, сияв с семенников оболочку, паренхиму измельчают и тщательно растирают в фарфоровой ступке или гомогенизаторе. К растертой массе добавляют дихлорамин Б и снова тщательно растирают. Хранят мазь в темных широкогорлых банках с притертой пробкой и прохладном помещении.
С лечебной целью препарат наносят на стерильную салфетку слоем толщиной 2—3 мм с таким расчетом, чтобы покрыть мазью нею площадь гранулирующего дефекта. Салфетку фиксируют попязкои. Повторное применение мази производят через 3—5 дней. 11ерсд наложением мази поверхность раны, язвы обрабатывают 2-процентным раствором хлорацида.
Приготовление порошкообразных тканевых препаратов. В ве-геринарной практике с лечебной целью применяется высушенная кровь крупного рогатого скота и птицы. Этим препаратом присы-пают поверхность ран и язв или его вводят в состав эмульсий.
Приготовление сухого препарата из крови. Кровь берут при за-бое здоровых животных и птицы в стерильную банку с притертой пробкой. Полученную кровь дефибринируют и помещают на 2— 3 дня в рефрижератор для консервирования при температуре 2—4°, затем автоклавируют в течение 1 ч при температуре 120°. После автоклавирования сливают жидкую часть крови, а сгустки режут на мелкие кусочки и помещают в стерильные кюветы, которые ставят в сушильный шкаф для высушивания при температуре 37—39°. Сухие сгустки растирают в стерильной фарфоровой ступке или в шаровой мельнице до порошкообразного состояния. Приготовленный порошок насыпают в стерильные флаконы емкостью 100—200 мл, закрывают пробками и автоклавируют в течение получаса при температуре 120°. В этих флаконах порошкообразный препарат крови может сохраняться до года.
Б ветеринарной практике при лечении ран и язв применяют смесь из одной части сухой крови и двух частей рыбьего жира.
Приготовление сухого тканевого биостимулятора по методу В. П. Багинскас (1960 г.). При забое здоровых животных берут селезенку, печень, надпочечники, кровь, эмбрионы, которые помещают в холодильник на 4—6 суток при температуре 1—4° для консервации. Потом селезенку (64%), печень (10%), сгустки крови (15%), эмбрионы, которые помещают в холодильник на 4—6 суток при температуре I—4° для консервации. Потом селезенку (64%), печень (10%), сгустки крови (15%), эмбрионы (10%) и надпочечники (до 1%) измельчают в мясорубке, загружают в котел Лаабса и сушат 1 ч при температуре внутри котла 90—100° и давлении пара в рубашке 1,5 ат. Затем включают вакуумустройство, давление пара в рубашке котла уменьшают до 0,5 ат и сушку продолжают при температуре внутри котла 60—80°. Высушенную тканевую массу измельчают в шаровой мельнице в тонкий порошок. Готовый препарат — сухой тонкий однородный порошок красно-коричневого цвета со специфическим запахом тканей без запаха гниения и плесени.
Физико-химические показатели препарата: влажность не более 9%, содержание жира— 15—16, протеина — 75—76, золы — 10— 10,3%, витамина Bi — 1,15 70%, В2 —4,78, РР—17,73, кобальта—0,143, меди —4,04, фосфора —1,31 и кальция —0v52 мг%, марганца — следы, железа — 332—388 мг%.
Сухой тканевый биостимулятор добавляется к концентрированным кормам один раз в день в дозе 0,06—ОД г на 1 кг веса. Его можно примешивать к комбикорму на заводах.
Приготовление сухого биостимулятора по В. М. Королеву "(1967). Для производства сухого биостимулятора применяют 3-месячные плоды, околоплодные оболочки и матки всех видов уПойных животных. Сырье получают от здорового скота сразу же мосле убоя. Беременную матку, взятую из туши во время нутров-1чг. вскрывают, выпускают околоплодную жидкость, обмывают изотопическим раствором хлорида натрия, укладывают на перга-мпп в алюминиевые тазики и помещают в холодильные камеры при температуре 2—4° на 5—7 суток. После консервации сырье измельчают на волчке, а затем на коллоидной мельнице. Массу сушит в горизонтальном вакуумном котле с мешалкой (Лаабса) или к накуумвальцевой сушилке при температуре до 50° под вакуумом (»'")(!—700 мм, а затем в сушильном шкафе до влажности 7—10%.
Высушенную массу измельчают на шаровой мельнице, просеиваот через сито № 20 и расфасовывают.