Двайт Боуман, Джанис Лиотта, департамент микробиологии и иммунологии, Колледж ветеринарной медицины, Итака, США
Лямблиоз - зоонозное инвазионное заболевание собак, возбудитель которого (Giardia duodenalis) родственен возбудителю лямблиоза человека и других видов животных. Giardia duodenalis является одним из наиболее распространенных паразитов у собак во всем мире,
Терапия лямблиоза при проявлении клинических признаков не представляет трудностей. В то же время лечение собак с латентным течением заболевания часто выглядит необоснованным, излишним или потенциально проблематичным, так как может привести к развитию резистентных форм возбудителя паразитарной инвазии. У собак и людей в развитой части мира латентное течение заболевания встречается редко, это связано с тем, что они соблюдают определенную гигиену, исключая попадание цист в организм. У собак, содержащихся в хороших условиях, зараженность составляет около 10%, а у собак в питомниках с неудовлетворительными условиями около 100%. Ранее регистрировали вспышки острого течения заболевания лямблиозом у человека с преимущественным распространением возбудителя через воду. И в той местности, где возникала вторичная вспышка, первично переболевшие люди, как правило, не болели, что говорит о возникновении иммунитета. У людей на фоне иммуносупрессии развивается высокая чувствительность к Giardia duodenalis, которая может вызвать острую диарею. В настоящее время наблюдается некая схожесть сценариев развития болезни у собак и болезни у человека, так как собаки и кошки, так же, как и их владельцы, как правило, используют очень чистую питьевую воду, в результате чего не происходит регулярного поступления в организм цист из окружающей среды и от других животных. И при первом попадании цист в организм таких животных развивается профузная диарея.
Размещение внешне благополучных животных-носителей паразита вместе со здоровыми - это всегда высокий риск для заражения последних даже при наличии хорошего ухода с соблюдением режимов санации и гигиены. Поэтому возникает вопрос о целесообразности применения терапевтических мероприятий в отношении собак с латентной формой течения. Современные схемы лечения лямблиоза у собак основываются-на применении нескольких различных групп препаратов. Наиболее часто для лечения лямблиоза собак применяется метронидазол, хотя он не утвержден «для животных», в отличие от людей. В некоторых исследованиях группы бензилмендазолов, например, у фебендазола и оксифендазола, была определена относительная эффективность в отношении лямблий. Различные комбинации пирантела, фебантела и празиквантела показали высокую эффективность в освобождении организма собак от лямблий.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
В данном исследовании было использовано 14 здоровых собак, отобранных методом случайной выборки, которые содержались индивидуально в клетках с приподнятым сетчатым полом. Размеры клеток от 2 (4) х б х 3 м. Между клетками был помещен твердый пропиленовый разделитель для предотвращения контаминации между животными. В помещении поддерживалась температура 24°С и относительная влажность 70%, освещение было естественным в 12-часовом цикле. Корм и вода в свободном доступе без ограничений. Клетки, поддоны и помещение убирались ежедневно, утром. Собак также ежедневно осматривали, оценивали состояние здоровья и кондиции. Фекалии собак собирались в специализированную септическую систему, затем подвергались обработке и длительному хранению. В фекалиях всех собак были обнаружены цисты Giardiasp. Животных разделили на две группы, по 7 особей в каждой. В первой группе собакам в качестве терапевтического средства использовали перорально комбинацию фебантела, празиквантела и пирантела эмбоната («Дронтал® Плюс») в рекомендованной дозе на 9-й, 10-й и 11-й день эксперимента. Вторая группа животных была контрольной.
Методика исследования фекалий
В течение первых дней эксперимента были собраны образцы фекалий, которые исследовали методом флотации в растворе сульфата цинка в технической концентрации. Начиная с девятого дня (начало экспериментальной части) образцы фекалий исследовались количественным методом прямой флюоресценции, который по-
Рис. 1 Giardia duodenalis
Рис. 2. Среднее значение по группе количества цист (log 10) в грамме
зволяет определить количество цист в грамме фекалий. Использовали также метод количественного определения цист в растворе, который является модифицированным методом подсчета цист в осадке. Процедура, использованная для иммунофлюоресцентного анализа, была модифицирована из обучающего набора. Для определения количества цист в грамме фекалий количество цист, полученных в результате подсчета, умножалось на 10 000, Определение сухого веса фекалий определялось методом отбора индивидуальных проб кала от 10 до 20 г, которые затем высушивались при температуре 108°С в течение 24 часов, после чего проводилось точное взвешивание.
Количество цист определялось количественным методом прямой флюоресценции, образцы проб были отобраны в 1-й, 3-й, 5-й, б-й день исследования, затем ежедневно, начиная с 9-го дня и до конца исследований (девятый день после последнего применения препарата). Минимальный уровень определения цист составил 10 000 цист в грамме фекалий. Так как количество цист в грамме зависит от консистенции фекалий, результаты подсчета выражены в количестве цист на грамм сухого веса фекалий. Статистическая обработка данных была проведена с помощью проверки критериев Стьюдента.
РЕЗУЛЬТАТЫ.
В группе контроля у двух собак не обнаружены цисты на 19-й день эксперимента, в фекалиях четырех собак обнаруживались цисты ежедневно, три собаки выделяли цисты периодически. У собак в экспериментальной группе в первые пять дней после лечения цисты в фекалиях найдены не были. И только у одной собаки были обнаружены цисты в фекалиях во второй день после последнего дня лечения.
У собак в экспериментальной группе заметно меньшее, количество цист содержалось в фекалиях на протяжении всей терапии (табл. 1). Сравнение количества цист в грамме фекалий между двумя группами в образцах, собранных до начала лечения, не показало значительного различия (среднее геометрическое значение: контрольная группа = 162 000; экспериментальная группа = 60 300; р = 0,51). Среднее число цист в грамме фекалий у собак в экспериментальной группе было значительно снижено на второй и третий день терапии (среднее геометрическое значение 447 000,1050, р = 0,004)
При рассмотрении образцов фекалий, собранных через неделю после лечения (16-й день), прослеживается тенденция к снижению количества цист в грамме фекалий у собак экспериментальной группы (геометрическое значение: контрольная = 23 400; экспериментальная 5,0; р < 0,000, рис. 2).
ОБСУЖДЕНИЕ.
При применении «Дронтал® Плюс» втечениетрех последующих дней в рекомендованных дозах выделение uncrGiardia sp. у собак прекращается. Тем не менее, начиная с 17-го дня эксперимента, наблюдается увеличение количества собак, выделяющих цисты, и количества цист, выделяемых ими. Этот феномен также отмечен в исследованиях других ученых (Montoyaet al., 2008). Даже при строгом соблюдении условий биоизолированности животных друг от друга невозможно исключить реинфекцию, поскольку препатентный период у собак может быть очень коротким - 5 дней (Вагг and Bowman, 2006). Такие факторы, как купание животных и смена места обитания после лечения, также могут оказать значительное влияние на продолжительность и эффективность лечения. К сожалению, в этом эксперименте были также собаки из группы контроля, которые спонтанно прекратили выделение цист в последний день эксперимента. Предположение, объясняющее этот феномен, заключается в том, что методика исследования, используемая в данном эксперименте, не чувствительна к низким уровням цист. Метод исследования является флотационным методом и теоретически не чувствителен при уровне цист ниже 10 000 в 1 грамме В других работах авторы сравнивали цинк-сульфатный метод и метод прямой флюоресценции, который является строго позитивным. Сравнение методов показало, что при исследовании материала, полученного от 20 лабораторных биглей с продолжительным лямблиозом (более 77 дней), получено намного больше положительных результатов при исследовании методом прямой флюоресценции, чем при
Таблица 1. Средний геометрический показатель количества цист в грамме сухого веса фекалий у обработанных и животных в группе контроля на протяжении от 1 до 19 дня эксперимента
* Подсчет эффективности =((среднее значение в фуппе контроля - среднее значение в опытной группе) / среднее значение в группе контроля) х 100%
исследовании с помощью флотационного цинк-сульфатного метода. Метод прямой флюоресценции был однозначно позитивным, в то же время положительные результаты исследований при использовании цинк-сульфатного флотационного метода получили только в 50% случаев. Для данной экспериментальной схемы оценка результатов исследования по уровню антигенов достаточно проблематична, так как даже после успешно проведенной терапии неизвестен уровень освобождения организма от антигенов.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ.
Применение комбинации пирантела, фебантела и празиквантела в течение трех последующих дней в рекомендованной дозе при лечении лямблиоза собак показало относительную эффективность. Данная комбинация использована в препарате «Дронтал® Плюс» и может быть рекомендована для лечения лямблиоза у собак.
ЗАО «БАЙЕР»
(495) 234-2066,234-2055
E-mail: Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.
Web: www.bayeranimalheatth.ru
журнал "Современная ветеринарная медицина" №2 2010