Г.Р.Юсупова к.в.н., начальник НИС КГАВМ им. Н.Э.Баумана.

Установлено, что реакция непрямой гемаггпютинации с использованием антительного эритроцитарного диагностикума позволяет определить вирусоицидное действие химических веществ из различных классов 

Классическая чума свиней (КЧС) - высококонтагиозная инфекционная болезнь, характеризующаяся лихорадшй; поражением кровеносной и кроветворной систем, крупозным воспалением легких и крупозно-дифтерическим воспалением толстого отдела кишечника,

В настоящее время КЧС встречается повсеместно, за исключением США, Канады, Австралии, Исландии, Ирландии, Новой Зеландии, Норвегии, Швеции В результате плановых противоэпизоотических мероприятий \л, в частности, широкого применения живой вакцины, масштабы ее распространения в России резко сократились, Так, по данным В.А. Апалькина (2005) в Российской Федерации КЧС зарегистрирована в 2004 г, в одном пункте, а в 2005г. - в шести, где заболело и уничтожено 1213 голов свиней, Несмотря на ограниченные эпизоотические вспышки, для профилактики заболевания государство тратит колоссальные суммы на вакцинацию свинопоголовья.

В связи с этим, наряду с разработкой новых эффективных вакцин и средств диагностики, актуальным остается изыскание новых, экологически безопасных дезинфектантов.

Вопросам устойчивости вируса КЧС во внешней среде посвящено небольшое количество работ, в которых показано, что его устойчивость зависит от характера материала, в котором содержится вирус (кусочки ткани органов, кровь, моча и др.). температуры, влажности высыхания, процессов гниения По мнению П.И. Притулина, А.И. Карелина (1969) вирус КЧС весьма устойчив к воздействию внешних факторов окружающей среды, особенно низким температурам В замороженном состоянии он сохраняется многие месяцы и даже годы (XT Гизатуллин и сотр., 1973; Г Р Юсупова, 1990). К высушиванию вирус малочувствителен и сохраняет вирулентность от 3 до б лет (Г.Р Юсупова, 1990).

В настоящее время для дезинфекции при КЧС широко используют 1,0-2,5%-ный раствор едкого натра, инактивирующий вирус за 60 минут. Н.А Лагуткин (1983) установил, что химиопрепарат А-24 в концентрации 500 мкг/мл полностью инактивирует 9,0 log ККИ-Д50/мл вакцинного штамма "ЛКВНИИВВиМ" вируса КЧС, что позволяет получать лабораторные образцы концентрированной культуральной инактивированной вакцины против КЧС.

В ветеринарной практике также используют 3%-ный раствор крезола, 5%-ный раствор фенола, 2,5%-ный раствор формальдегида, хлорную известь в разведении 1:5 и 1:20 (П.И. Притулин идр,; 1969) Однако как справедливо отмечают А.З. Равилов и др. (1974), B.C. Угрюмова (1980) проблема изыскания новых эффективных препаратов для ветеринарной дезинфекции остается актуальной. Однако работ, касающихся изыскания новых средств для дезинфекции при классической чуме свиней единичны (В.Х. Павлов, 1989).

Целью наших исследования явилось изыскание новых дезинфектантов, наиболее полно обеззараживающих вирус КЧС во внешней среде.

Материалы и методы. При изучении предполагаемых дезинфицирующих средств испытуемых химических соединений применяли "Методические указания по первичному отбору дезинфицирующих средств при особо опасных инфекциях по изменению антигенной активности возбудителей, выявляемой с помощью серологических реакций" (ута ГУВ ГАПК СМ СССР по продовольствию и закупкам 5 06 1990г) Постановку РИГА осуществляли согласно наставлению, разработанному Р.Х, Юсуповым и Г X. Ильясовой (1989),

Результаты исследований. Первичному испытанию для изучения инактивирующего действия в отношении вируса КЧС подвергнуто 50 препаратов, относящихся к различным классам химических соединений, в их число входили как синтезированные препараты, так и отходы химической и нефтехимической промышленности (табл)

Из представленных в таблице данных видно, что большинство исследованных препаратов обладают инактивирующим действием на вирус КЧС. Так, из числа исследованных препаратов инактивирующими свойствами в отношении вируса чумы свиней обладали синтезированные препараты, полученные из Института органической и физической химии им. А Е Арбузова (№№ 290, 319, 321, 46, 291, 418, 461, 411, 412, Ф-761,

Перечень химических веществ, использованных для первичного испытания инактивирующего действия их на вирус КЧС

Обозначение:

+ - обладает инактивирующим действием на вирус КЧС; - - не обладает инактивирующим действием на вирус КЧС.

515, 516, 517, 369, 82а) и ряд других препаратов, полученных из ВНИИВСГиЭ (хлорнонизид, ДП-2, дезоксон-2, глутаровый альдегид, сульфохлорантин, гипохлорит кальция технический), и также отходы химической и нефтехимической промышленности (№ 756, ТРФН, феносмолин, сульфатно-форшатный раствор, щелочные воды, образцы №№ 1: 2, 4, упаренные щелока, гипохлорит кальция технический),

Однако, учитывая острый дефицит дезинфицирующих средств при КЧС, а производство синтезированных препаратов находится в стадии разработки, детальному изучению были подвергнуты три препарата - феносмолин, сульфатно-формизтный раствор (СФР) и натриевая сольдихлориэоциануроеой кислоты (ДП-2), которые общедоступны, однако их инактивирующая активность в отношении вируса КЧС не была изучена.

С целью определения достоверности метода первичного отбора по степени снижения или отсутствия антигенной активности, первоначальные опыты были проведены с использованием общепринятого при КЧС дезинфектанта - едкого натра.

Проведенные исследования показали, что под действием растворов едкого натра происходит снижение антигенной активности вируса, выявляемой в РИГА с использованием антительного эритроцитарного диагностикумз При этом отмечалось снижение гемагглютинирующей активности под действием 0,1-0,5%-ного раствора щелочи, а при 3%-ной и 5%-ной концентрациях реакция была отрицательной, то есть происходило полное разрушение антигенности. В соответствующих контролях реакция была положительной - гемагглютинирующая активность составляла 1:8 -1:16. Полученные результаты позволили продолжить отработку РИГА для изучения инактивирующих свойств химических веществ при КЧС

В результате исследований установлено, что феносмолин разрушает тема ггл юти пирующую активность в 0,5%-ной концентрации, снижение антигенности отмечалось уже при применении 0,1% Сульфатно-формиатный раствор более активен в отношении вируса классической чумы свиней - разрушение гемагглютинирующей активности наблюдается в 0,25%; при этом активность вируса резко снижается при применении уже 0,05%, ДП-2 по своему действию на антигенность вируса был аналогичен едкому натру. При использовании в качестве вирусного материала вирусвакцины не были установлены существенные изменения в процессе инактивации (разрушение гемагглютинирующей активности), а именно, концентрации, действующие на гемаггл юти пирующую активность, оставались на том же уровне, и при этом наиболее существенное влияние оказывал сульфатно-формизтный раствор.

Таким образом, проведенные исследования убедительно показали, что реакция непрямой гемагглютинации (РИГА) с использованием антительного эритроцитарного диагностикума позволяет определить вирусоицидное действие изучаемых химических веществ из различных классов. При этом следует отметить, что при первичном отборе (скрининге) в качестве вирусного материала можно использовать вирусвакцину против КЧС,

Литература

1 Апалькин В А Эпизоотическая ситуация по особо опасным и карантинным болезням животных // Матер, Межд симпозиума "научные основы обеспечения животных от экотоксикантов, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний".-Казань -2005.-4.1 -С 3-6.

2.  Гизатуллин Х.Г, Юсупов Р X. Чума свиней и современные методы ее лабораторной диагностики // Тзткнигшэдат, -Казань 1973,-173с

3.  Лагуткин Н.А. Перспективы направленного синтеза и эмпирического поиска  антивирусных  хишопрепаратов /7 Вопросы ветеринарной вирусологии: Тезисы докладов -Покров -1983 -С.137-139,

4 Методические указания по первичному отбору дезинфицирующих средств при особо опасных инфекциях по изменению антигенной активности возбудителей, выявляемой с помощью серологических реакций: утв. ГУВ СМ СССР по продовольствию и закупкам 5.06.1990г.

5.  Павлов В.Х Дисс... кандвет нзук Покров. 1989.-127с.

6.  Притулин П.И., Карелин !ЛА Чума свиней, основы профилактики болезней свиней // Россельхозиздэт, Москва  1969. -С.57-70.

7   Равилов А 3., Селиванова А С, Угрюмова В С Изыскание химических соединений, оказывающих инактивирующее действие е отношении вируса ящура // Матер, докладов Всес научной конф., посвящ, 100-летию КГВИ -Казань, 1974. -T.I -С 222-225

8   УгрюмовзВС Изыскание дезинфицирующих средств при ящуре//Актуальные вопросы вет вирусологии -Казань, 1980 С. 16.

9.  Юсупова Г.Р Дисс. канд, вет наук. Казань 1991.-115с,

10. Юсупов Р.Х , Ильясова ГХ. Наставление по постановке РИГА с антительным эритроцитарным диагностикумом при классической чуме евшей: утв ГУВ ГАПК СССР 4 07

журнал "Ветеринарный врач" №2 2007