Чума плотоядных (ЧП) является остропротекающей контагиозной болезнью собак, и других плотоядных. Диагноз ставится на основании клинической картины  вируса чумы плотоядных (ВЧП) в биологическом материале. В НПО "НАРВАК" разработан и выпускается "Набор для выявления антигена чумы плотоядных иммуноферментным анализом (ИФА)" (ТУ 9388-003-42418073-98), основанный на принципе "сэндвич-ИФА". Однако в некоторых случаях есть необходимость определения антител к ВЧП. Такой анализ может быть полезным, например, при оценке поствакцинального иммунитета или иммунитета после перенесенного заболевания. Мы предлагаем простой иммуноферментный метод определения антител к ВЧП.
В основе метода лежит принцип блокировки антигена ВЧП антителами, содержащимися в исследуемых сыворотках и последующим определением степени блокировки антигена методом "сэндвич"-ИФА. Преимуществом предложенной методики является то, что она не требует дополнительных специфических компонентов, кроме тех, которые входят в состав выпускаемого НПО "НАРВАК" набора для определения антигена ВЧП.
В лунки иммунологического планшета вносили по 100 мкл антител к ВЧП в 0 1 М карбонатном буфере pli 9.5   Планшет инкубировали  18 ч при 4"С и O!\IIJS..JH
 
раствором PBST. Затем в лунки вносили по 25 мкл буфера PBST, содержащего 0.5% БСА (готовится из компонентов, входящих в состав НАБОРА) и по 25 мкл исследуемой сыворотки. В контрольные лунки вместо сыворотки вносили буфер. Антиген ВЧП разводили в 10 мл PBST с БСА и добавляли по 50 мкл лунки с сыворотками и контролями. После инкубации и отмывки добавляли по 100 мкл конъюгата, разведенного в PBST, содержащего 0.5% БСА и инкубировали 1 ч при 37оС. Промывали планшет PBST и вносили по 100 мкл субстратного раствора с тетраметилбензидином. Инкубировали 20 мин. при комнатной температуре и добавляли по 50 мкл 1 М H2SO4 для остановки реакции. Оптическую плотность при 450 нм измеряли на спектрофотометре с вертикальным лучом "Miiltiscan MCC" ( "Flow", Англия). Результаты анализа выражали в виде коэффициента ингибирования (Кинг.), расчитываемого по формуле:
Кинг.= 100 - (100 х (ODc / ODK),
где ODc - оптическая плотность исследуемой сыворотки, ODK- оптическая плотность в контрольных лунках (без сыворотки)
Показано, что значение Кинг для сывороток, не содержащих антител к ВЧП (титр в реакции нейтрализации РН менее 1:10 - 1:20) значение Кинг не превышало 50 - 60. Для сывороток с более высокими титрами антител в РН значения Кинг было выше 60. Чувствительность и специфичность метода составляла 95 и 85%, соответственно.
При параллельном исследовании биологического материала от 87 собак на наличие антигена и антител к ВЧП показано, что сыворотки здоровых вакцинированных животных через 6 месяцев после вакцинации как правило положительные (Кинг выше 60). У здоровых невакцинированных животных Кинг менее 50. Антиген у этих животных не определялся. У животных с клиническими признаками ЧП детектировали антиген, но антитела практически отсутствовали. По-видимому, при вирусемии антитела в значительной степени блокированы антигеном.
Таким образом, предложенный метод может использоваться для определения напряженности иммунитета и выявления более полной клинической картины заболевания ЧП.