ЕЛ. Завьялова, кандидат биологических наук,
А.Е. Дрошнев, кандидат биологических наук,
М.И. Гулюкин, доктор ветеринарных наук, академик РАСХН,
ГНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени ЯР. Коваленко (ВИЭВ)» (Москва)
Н.Р. Калинина
ГНУ «Полярный институт рыбного хозяйства и океанографии (ПИНРО)» (Мурманск)
Введение
Анестезия (др.-греч. avaiaBrima — без чувства) — уменьшение чувствительности какой-либо области тела или органа, вплоть до полной ее потери. Искусственная анестезия вызывается путем применения различных средств в целях обезболивания, например при хирургических операциях или иных болезненных манипуляциях. Искусственную анестезию используют с 1847 г., когда Джеймс Симпсон открыл хлороформ.
Наркоз (др.-греч. уаркюслд — онемение, оцепенение; синонимы: общее обезболивание, общая анестезия) — искусственно вызванное обратимое состояние торможения центральной нервной системы, которое сопровождается потерей сознания, сном, амнезией, обезболиванием, расслаблением скелетных мышц и потерей контроля над некоторыми рефлексами при введении одного или нескольких общих анестетиков, оптимальная доза и комбинация которых подбирается анестезиологом с учетом индивидуальных осо-бенностей конкретного пациента и в зависимости от типа процедуры [1].
В аквакультуре анестезию применяют при манипуляциях с рыбой (вакцинация, сцеживание икры и спермы, бонитировка), чтобы избежать травмати-зации внутренних органов и повреждения покровов, жабр. Полностью усыплять рыбу не всегда нужно, часто достаточно ее успокоить, чтобы она не билась, к тому же анестезирующие средства обладают бо-леутоляющим действием. Целесообразно подбирать концентрацию раствора для каждого конкретного случая [2].
В зарубежной практике для этой цели применяют анестетик MS-222 Sandoz. Аналог этого препарата — трикаин метанесульфонат (коммерческие названия — метакаин, метакаинсульфонат, трикаин). Он состоит из производного бензокаина, к которому добавлен сульфонатный радикал. Это дополнение делает трикаин более водорастворимым, но в растворе он становится кислотой. При добавлении MS-222 в воду рыбы впадают в состояние наркоза: у них значительно снижаются метаболизм и газообмен, движения становятся замедленными. Им требуется меньше кис-лорода, а следовательно, они могут находиться в меньших емкостях. Преимущества этого анестетика: быстрое всасывание и выведение, что позволяет его применять для товарной рыбы. По данным американских ученых, время полного выведения анестетика из организма рыбы 21 день. Недостаток трикаина — кис-лотность, которую он приобретает в водном растворе, высокая стоимость и отсутствие производственных объемов на российском рынке [3].
Довольно давно при искусственном воспроизводстве различных видов рыб, таких как карп, европейский сом, африканский и канальный сомики, некоторые виды осетровых, применяют гвоздичное масло (Caryophylli etheroleum). Рассчитанное количество анестетика растворяют в небольшом объеме горячей воды, долго и тщательно перемешивают до получения мелкодисперсной взвеси, а затем разводят до рабочего объема чистой водой [4]. Один из недостатков данного способа — для качественной анестезии необходимо натуральное эфирное масло, а отечественный аптечный рынок наводнен подделками-ароматизаторами.
Анестезирующие средства для рыб применяют в форме ванн. При этом рыба получает анестезирующие вещества через рот, жабры и кожу. Дозировку рассчитывают на основе объема воды, а не массы рыбы. Оптимальная дозировка может меняться в за-висимости от количества рыб, возраста, вида и состояния здоровья особей, которых предстоит подвергнуть анестезии, а также от факторов окружающей среды (например, температуры и/или жесткости воды). Из рассчитанного количества препарата готовят маточный раствор (при необходимости), затем из него рабочий раствор, в который погружают рыб. При усыплении применяют аэрацию или слабую ок-сигенацию воды. Для пробуждения рыбы используют отдельный резервуар с чистой водой, насыщенной кислородом.
Действие большой дозы анестезирующего средства, необходимой для достижения сильного седативного эффекта, может привести к тому, что рыба будет последовательно переходить на все более глубокие стадии потери чувствительности, пока не наступит остановка дыхания и смерть. По этой причине за рыбой во время процедуры постоянно наблюдают и в случае появления угрожающих признаков как можно быстрее переносят ее в воду, свободную от анестезирующих веществ.
Цель исследования
Провести скрининг анестезирующих веществ, определить рабочие и летальные дозировки, подобрать схемы обездвиживания для радужной форели разного возраста.
Материалы и методы
В ходе работы были апробированы лекарственные средства из группы местных анестетиков — трикаин (MS-222), лидокаин, новокаин, бензокаин, а также гвоздичное масло, обладающее антиоксидантны-ми, антисептическими свойствами. При выборе пре-паратов руководствовались опытом их применения в других странах. Например, трикаин широко используют в рыбоводческих хозяйствах Финляндии, Норвегии, Швеции. В России его достать сложно, особенно в больших количествах, кроме того, это очень дорогой препарат. Поэтому мы использовали другие средства из этой группы, а трикаин выступал как препарат сравнения. Гвоздичное масло применяют в Чехии, Польше для работы с рыбами осетровых пород во время взятия половых продуктов. Исследования были проведены при технологически обоснованной температуре 8... 10 "С, оптимальной для манипуляций с радужной форелью.
Результаты
Нами была проведена серия экспериментов и на практике проверена возможность использования пяти препаратов для анестезии радужной форели разного возраста. Учитывали следующие критерии:
• наркотическую активность — рабочую концентрацию вещества;
• наркотическую широту, т. е. достаточное соотношение концентраций анестетика в крови, вызывающих нужный уровень наркоза, и концентраций, приводящих к параличу жизненно важных функций;
• управляемость наркоза — быстрое введение, хорошую регулируемость его глубины при изменении концентрации анестетика в воде, быстрое пробуждение;
• стадии возбуждения — при введении в наркоз и выходе из него, отсутствие раздражающего действия на слизистые, отсутствие токсического влияния на печень и почки;
• технические условия — длительность хранения, невоспламеняемость, удобство и простоту в применении.
Результаты исследования приведены в таблице.
Исключительно удобными в применении оказались трикаин, лидокаин и бензокаин: это хорошо растворимые в воде порошки, обеспечивающие быстрое как усыпление рыбы, так и восстановление ее после наркоза. Самая высокая управляемость наркоза у лидокаина: успокаивать и усыплять рыбу можно изменением концентрации. Также для лидокаина характерно самое продолжительное время нахождения рыбы в анестезирующем растворе без вреда для здоровья.
При использовании 0,02 %-го раствора новокаина через 20...30 мин. у рыб замедлялись движения, но других признаков прогрессирующей анестезии не наблюдали. Во время опытов форель находилась под наркозом до 7 суток. За счет снижения двигательной ак-тивности рыб уменьшалось потребление кислорода, а нормы посадки рыб при этом можно увеличить вдвое. Это свойство позволяет использовать высокие плотности посадки гидробионтов во время транспортировки.
По литературным данным, время полного выведения химических анестетиков из организма рыбы составляет 21 день. В этом отношении гвоздичное масло имеет значительные преимущества за счет ес-тественного происхождения, оно нетоксично и не ку-мулируется в тканях рыб. Однако его применение связано с большими технологическими трудностями. Во-первых, для растворения необходимо использовать горячую воду (не менее 50 °С), что сложно выполнимо в условиях садковых хозяйств или в марикультуре. Во-вторых, препарат представляет собой масляный раствор, который приходится очень долго и тщательно перемешивать с водой до получения мелкодис-персной взвеси.
Практические рекомендации лаборатории ихтиопатологии ВИЭВ по анестезии радужной форели лидокаином
В результате исследований была отработана методика использования лидокаина для анестезии радужной форели во время бонитировок и вакцинации, обеспечивающая удобство в работе для персонала и безболезненность для рыб маточного стада и рыбо-посадочного материала.
Данные по испытанию препаратов для анестезии радужной форели
Концентрация мг/1000 мл
Лидокаин (Lidocaine) — химическое наименование: 2-диэтиламино-1чГ-(2',6'-диметилфенил) ацета-мид (в форме гидрохлорида) — лекарственное средство, обладающее местно анестезирующим эффектом. Брутто-формула C14H22N2O, молекулярная масса 234,34 г/моль, белый кристаллический порошок без запаха, слабогорького вкуса. Фармакологическое действие — местно анестезирующее. Блокирует потенциал-зависимые натриевые каналы, что препятствует генерации импульсов в окончаниях чувствительных нервов и проведению импульсов по нервным волокнам. Подавляет проведение не только болевых, но и импульсов других модальностей. При местном применении расширяет сосуды, не оказывает местно раздражающего действия.
Рабочий раствор анестетика готовят непосредственно в емкости, где будет проводиться анестезия, при постоянном перемешивании препарат хорошо растворяется в воде. В зависимости от характера планируемой работы применяют различные дозировки лидокаина. Во время работы необходимо измерять рН раствора и использовать вещества, обеспечивающие доведение его значения до нейтрального (бикарбонат натрия).
Необходимая для работы стадия анестезии характеризуется отсутствием реакции (изменение позы), слабым уменьшением респираторной нормы, отсутствием равновесия (рыба лежит на боку), уменьшением мышечного тонуса.
При концентрации лидокаина 120 мг/л (0,012 %-й раствор) успокоение радужной форели наступает через 10 мин., что удобно для клинического осмотра, бонитировки, взятия крови у рыб маточного и ремонтного поголовья. При 160 мг/л (0,016 %-й раствор) успокоение наступает за 8 мин., данную концентрацию мож-но использовать для взятия половых продуктов, при 200 мг/л (0,02 %-й раствор) наступает быстрое обездвиживание, что пригодно для вакцинации — самого короткого из технологических процессов, чем обеспечивается бесперебойность работы.
При передозировке у рыб прекращаются движения жаберных крышек, что может вызвать нарушение газообмена и гибель. Обычно при одной и той же концентрации анестетика при более высокой температуре его действие эффективнее, чем при низкой. Взрослые рыбы дольше впадают в состояние наркоза и мед-леннее растормаживаются после анестезии, чем мальки. Но концентрацию раствора лидокаина повышать не следует, иначе у рыб возможно отравление. Продолжительность пребывания рыбы в растворе лидокаина не должна превышать 20 мин. Прекращение наркоза и пробуждение достигается пересадкой рыб в свежую воду.
Поскольку анестезирующие вещества впитываются через кожу, необходимо применять средства личной защиты (резиновые перчатки, сапоги, фартук, головной убор, респиратор). При использовании оксигенации нужно избегать длительной работы в непосредственной близости от емкости с оксигени-руемым раствором анестезирующего вещества, так как испарения могут вызвать раздражение слизистых оболочек и кожи [5].
Выводы
Ни один из пяти протестированных анестезирующих препаратов: трикаин, лидокаин, бензокаин, новокаин и гвоздичное масло не удовлетворяет полностью требованиям практики. Каждый характеризуется определенными преимуществами и недос-татками, что в конечном итоге позволит сделать рациональный выбор с учетом характера предполагаемой работы и условий наркоза. Однако использование бензокаина и лидокаина экономически более оправданно в сравнении с применением трика-ина, так как препараты недорогие, доступные, зарегистрированы на территории РФ, не относятся к наркотическим средствам и по условиям хранения входят в список Б. Это особенно актуально при работе в рыбоводческих хозяйствах.
Библиография
1. http://ru.wikipedia.org
2. Бейли М., Бергресс П. Золотая книга аквариумиста (Полный справочник по уходу за пресноводными тропическими рыбами) //ModernLib.Ru.
3. Кулясова О.В., Мельников А.В., Смирнов Н.М. Анестезия рыб //Ветеринария, 2001; 1:21.
4. Микодина Е.В., Седова М.А., Пьянова СВ., Коуржил Я. Экологичный анестетик «гвоздичное масло» в биотехнике искусственного воспроизводства рыб // Рыбоводство, 2010; 3-4:46—47.
5. Ракхонен Р., Веннерстрем П., Ринтамяки-Киннунен П., Каннел Р. Здоровая рыба (Профилактика, диагностика и лечение болезней). — Хельсинки: Nykypaino, 2003.
Российский ветеринарный журнал №4 2012