Н.М. КОЛЫЧЕВ, М.И. ПЕТРОВА, Л.И. ЛАЗАРЕВА
ИВМ Омского ГАУ
Энтерококковую инфекцию чаще всего рассматривают как заболевание новорожденного молодняка, проявляющееся пупочным сепсисом, диареей, бронхо-пневмонией, артритами и др. Особую опасность представляют коровы, больные энтерококковыми маститами и метритами, выделяющие возбудитель с молоком и воспалительным экссудатом. Заражение происходит аэрогенным, алиментарным и контактными путями, при нарушении технологии получения и выращивания молодняка. 15-20 лет назад многие ученые считал, что факторами передачи являются молоко и молочная посуда.
Так, Н.Г Балашов (1980) утверждал, что энтерококки - это микроорганизмы-сапрофиты, которые не вызывают инфекционных болезней, воспалений половых органов, гибели эмбрионов и плодов и других гнойно-воспалительных процессов. Однако В.И. Покровский (1999) и А.И. Ятусевич (2001) считали, что энтерококки действительно постоянно обитают в кишечнике здоровых животных, но при попадании в другие органы и системы организма вызывают септические состояния, урогенитальные инфекции, эндокардиты и др.
Сперму быков-производителей, предназначенную для искусственного осеменения коров, не рассматривали как фактор передачи данной инфекции.
Цель нашей работы - установить частоту обсемененности замороженной спермы быков-производителей энтерококками, изучить их видовой состав, биохимические и патогенные свойства, а также антибиотикорезистентность.
Материалы и методы. В опытах исследовали разбавленную замороженную сперму в соломинках, предназначенную для искусственного осеменения коров, полученную из ФГУП "Омское" по племенной работе. Для выделения энтерококков использовали МПБ с 0,5% глюкозы, энтерококкагар (ГНЦ прикладной микробиологии, г. Оболенск). Видовой состав определяли на среде с добавлением теллурита калия; биохимические свойства -общепринятыми способами, чувствительность к антибиотикам - методом диффузии в агар. Гемолитическую активность изучали на МПА с 5% эритроцитов барана.
Результаты исследований и обсуждение. При исследовании 21 эякулята в 2 повторностях от 11 быков-производителей в 11 эякулятах роста патогенной и условно-патогенной микрофлоры, грибов и плесеней не обнаружили. В 10 эякулятах от 6 животных выделили энтерококки: в 7 -Enterococcus faecalis и в 3 - Enterococcus faecium. Все выявленные культуры росли в солевом, желчном, щелочном бульонах, редуцировали метиленовую синьку в молоке, разлагали глюкозу, сорбит, лактозу, маннит, салицин и сахарозу. При изучении гемолитических свойств изолированных культур установили а-гемолиз и в 2 случаях - р-гемолиз у Enterococcus faecium.
Выделенные культуры энтерококков проявляли выраженную устойчивость к 3 и более группам антибиотиков и химиотерапевтических препаратов.
Известно, что антиэнтерококковой активностью обладают некоторые р-лактамы (амино- и уреидопенициллины, карбопенемы), тетрациклины, а также новые фторхинолоны [5]. В нашем опыте лишь 1/3 штаммов была чувствительна к аминопенемам и карбопенемам, гликопептидам, тетрациклинам. Наибольшую устойчивость энтерококки проявили к аминогликозидам (85,7 %) и фторхинолонам (66,7 %).
Необходимо отметить, что все перечисленные группы антибиотиков и химио-терапевтических препаратов обладали в отношении энтерококков в общепринятых концентрациях только бактериостатическим действием. Лишь аминогликозиды в высоких концентрациях проявляли бактерицидное действие, однако их применение в подобных концентрациях невозможно из-за высокой токсичности.
Мы получили интересные данные, свидетельствующие об устойчивости 33,3% энтерококков к ванкомицину, относящемуся к группе гликопептидов. В медицинской литературе сообщается, что ванкомицин обладает высоким ингибиторным потенциалом в отношении энтерококков и резистентные к нему культуры пока не описаны [3]. В ветеринарной практике ванкомицин не применяют из-за высокой стоимости. Устойчивость к нему может являться показателем множественной лекарственной резистентности у данных микроорганизмов и косвенно указывать на их повышенные вирулентные свойства [10, 11]. Выделение ванкомицинрезистентных энтерококков (ВРЭ) у больных людей сопровождается более тяжелым течением болезни, повышенной смертностью (37% против 16% при выделении ВРЭ), переходом в хроническую форму [7, 11].
Ванкомицин считают антибиотиком резерва и применяют его при устойчивости энтерококков к другим антибиотикам и химиотерапевтическим препаратам, поэтому наличие ВРЭ является показателем увеличения распространенности признака резистентности в микробной популяции [12,13].
При осеменении коров и первотелок спермой, обсемененной различными видами энтерококков, обладающих разной степенью вирулентности, наблюдали случаи патологического течения беременности и родов, закончившихся самопроизвольными абортами, рождением мертвого или нежизнеспособного молодняка. При бактериологическом исследовании спермы, содержимого желудков абортированных плодов и мертворожденных телят, патологических выделений из половых органов коров обнаруживали энтерококки.
Ликвидация энтерококковой инфекции среди маточного стада весьма проблематична. Энтерококки мультирезистентны ко многим антибактериальным препаратам, в том числе и к дезинфицирующим средствам, что позволяет им длительно сохраняться во внешней среде. Способность выживать в профессиональных фагоцитах [8, 9] обеспечивает им длительную персистенцию в организме, носительство и хроническое течение болезни.
Один из важных патогенных механизмов энтерококков - способность колонизировать поверхность слизистых оболочек. Обсемененная ими сперма, предназначенная для искусственного осеменения коров, потенциально опасна, так как способна вызывать вышеуказанные патологические явления [7, 9] и являться фактором передачи инфекции.
Вакцина против энтерококковой инфекции телят, ягнят и поросят утверждена Департаментом ветеринарии 13.11.1996, однако не разработаны регламент и дозы для профилактики болезни животных маточного стада в стационаре инфекции. Все это делает опасным присутствие в сперме энтерококков.
Заключение. Сперма, обсемененная энтерококками, является фактором передачи инфекции. При этом до 1/3 выделенных культур обладают повышенными вирулентными свойствами и антибиотикорезистентностью. Заражение ими коров через сперму приводит к широкой передаче инфекции среди маточного поголовья и телят, способствует массовому выделению возбудителя во внешнюю среду, что опасно для обслуживающего персонала. Существует угроза для здоровья людей, употребляющих в пищу мясо и молоко, полученные от больных животных, тем более что СанПиН 2.3.2.1078 - 01 не нормирует количество энтерококков в мясных и молочных продуктах [4].
ЛИТЕРАТУРА
1. Балашов Н.Г. Ветеринарный контроль при искусственном осеменении. - М.: ВГНКИ, 1980.
2. Медицинская микробиология/ Гл. ред. В.И. Покровский, O.K. Поздеев. - М., 1999.
3. Поляк М.С. и др. Питательные среды для медицинской микробиологии. - Санкт-Петербург, 2003.
4. Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы СанПиН 2.3.2.1078 - 01 "Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов". - М.: Минздрав России. 1999.
5. Сидоренко СВ. // Клиническая фармакология и терапия. 2004. № 2.
6. Ятусевич А.И., Андросик Н.Н. Малоизученные инфекционные и инвазионные болезни домашних животных. - Минск: Ураджай, 2001.
7. Edmond M. В. et al. // Clin. Infect. Dis. 1996. 23.
8. Gentre-Weeks C.R. et al. In Abstracts of the 98th General Meeting of the American Society for Microbiology, 1998. American Society for Microbiology, Washington, D.C.
9. Johnson A.P. // J. Antimicrob. Chemother. 1994. 33.
10. Lucas G.M. et al. // Clin. Infect. Dis. 1998. 26.
11. Mainous M.R. et al. The John Hopkins SICU Study Group. Arch. Surg. 1997.132.
12. Noble W. et al. // FEMS Microbial. Lett., 1992. 93. 13. Su Y.M. et al. // Infect. Immun, 1991
Журнал "Ветеринария" 11 2006