А.Л.Плохова - ведущий сотрудник ОАО «Институт биотехнологий ветеринарной медицины», Н.В.Мельник - д.в.н., зам.генерального директора ОАО «Институт биотехнологий ветеринарной медицины».

Увеличение отечественного производства зкологически   чистых,   качественных   продуктов питания, в том числе говядины и оленины, является неотъемлемой частью решения продовольственной программы

Однако основным препятствием, сдерживающим развитие животноводства и оленеводства, являются различные инфекционные болезни, приносящие значительный ущерб сельскому хозяйству, в списке которых одну из лидирующих позиций занимает некробактериоз -   болезнь, вызываемая анаэробной бактерией, характеризующаяся некротическими поражениями преимущественно органов головы, реже кожи и паренхиматозных органов. Возбудитель данного заболевания -   Fusabacterium necrophorum, был обнаружен 100 лет назад, а именно в конце 18 века, но, несмотря на это до сих пор не определено, является ли заболевание инфекцией или факторным заболеванием  В связи с такой неопределённостью, до настоящего времени не были разработаны эффективные специфические методы лечения и профилактики этой болезни, которая в настоящее время получила широкое распространение среди крупного рогатого скота и наносит колоссальный экономический ущерб, выражающийся, поданным В.А. Стародубцева, в недополучении одной тонны молока от каждой коровы и потере 30 - 40 % живой массы тела.

Огромные потери от этой болезни несёт и северное оленеводство, в период эпизоотии заболевают 30 - 40 % оленей, из числа которых погибает 50 %

Причиной, способствующей распространению болезни среди крупного рогатого скота и северных оленей, следует считать нарушения ветеринарно-санитарных и технологических нормативов, заключающиеся в высокой концентрации животных на ограниченных площадях, несоблюдении системы их содержания, что проявляется в отсутствии у животных сухой подстилки и моциона, использовании укороченных стойл, сырости в помещениях, недостатке грубых кормов

Среди северных оленей болезнь постоянно носит характер эпизоотии, но с кратковременным течением (преимущественно июль - август)

Возбудитель некробактериоэа обитает в рубце северных оленей и постоянно выделяется вместе с экскрементами во внешнюю среду. Болезнь приобретает характер эпизоотии а период жаркого лета и во время массового лета двукрылых насекомых. Основной причиной, способствующей возникновению и распространению заболеванию, является ослабление защитных функций организма. Это происходит при изменении характера и режима питания в жаркое время года при массовом нападении насекомых на животных

Для профилактики и борьбы с некробактериозом ранее применяли систему организационно-хозяйственных, ветерииарно-санитариых и лечебных мероприятий, предусматривающую систематическое лечение животных сульфаниламидными препаратами и антибиотиками. Результаты применения их, как правило, были малоэффективными, а средства специфической профилактики и лечения не были разработаны

Отсутствие сведений о результатах исследований на некробактериоз, по-видимому, связано, с несовершенством существующих методов диагностики, эффективность которых в лабораторных условиях очень низкая {А.А Самоволов, 1993), а также с доказательствами других исследователей о ведущей роли в возникновении некробактериоза F. Necrophorum , что ещё раз подтверждает, что указанный микроорганизм является специфическим возбудителем

Средства специфической профилактики против некробактериоза животных начали разрабатывать в 20 - 30-х годах 20 века. Результаты испытаний этих средств, в большинстве случаев, были отрицательными. Авторы, разработчики этих средств, пришли к выводу, что после переболевания некробактериозом иммунитет у животных не образуется. Это на долгие годы приостановило работу по разработке вакцины и лечебных сывороток. Неудачи, постигшие разработчиков, по нашему мнению, связаны с тем, что они готовили препараты из целых бактериальных клеток.

Биологическая промышленность до настоящего момента выпускала 3 инактивированные вакцины, в основном для профилактики некробактериоза крупного рогатого скота: нековак, нековак- стимул и инактивмро-ванную гидроокись алюминиевую вакцину.

Ю-Д. Караваевым, И Н. Семеновой и др., а ВИЭВ разработана и испытана инактивированная эмульсинвакцина против некробактериоза животных, а также гипериммунная сыворотка. В 2003 г. на вакцину утверждена нормативно - техническая документация, и она принята ДЛИ серийного производства.

При конструировании вакцины избрали принципиально новый путь, используя 8 качестве антигенов только токсины, продуцируемые бактериальной клеткой. Для этой цели исследования были направлены на отбор штамма возбудителя некробактериоза, обладающего наибольшей токсичной активностью. В результате длительной и кропотливой работы было выделено несколько штаммов возбудителя некробактериоза от больных животных, среди которых был отобран один, обладающий наибольшей токсичной активностью.

Для усиления токсичной активности штамма 0-1 (ВИЭВ) была проведена его селекция, в результате чего удалось закрепить токсичную активность штамма и приступить к конструированию вакцины.

В процессе изготовления вакцины токсин предварительно очищали, концентрировали и инактивировали.

Наилучшими адъювантными свойствами обладал масляный универсальный адъювант Далее нами было установлено, что иммуногенные свойства готового препарата сохраняются в течение 18 месяцев, и вакцина вызывает иммунитет у животных продолжительностью 6 месяцев.

Важным звеном в системе борьбы с некробактериозом животных является разработка методов и средств специфической терапии, а именно получение активной гипериммунной сыворотки. Работа в данном направлении проводилась с 1992-2000 года на базе ВИЭВ, а с 2000 г. по настоящее время осуществляется промышленное освоение препарата на ФГУП «Щёлковский биокомбинат».

В процессе работы был отобран наиболее иммунногенный штамм для проведения гипериммунизации животных, апробированы различные схемы гипериммунизации, среди которых наиболее оптимальная рекомендована для получения сыворотки на коровах-продуцентах, а также были разработаны методы консервирования сыворотки и установлена длительность сохранения её превентивных свойств.

Разработанный нами препарат был испытан в оленеводческих хозяйствах Магаданской области и в животноводческих хозяйствах Рязанской области. Проведенными исследованиями было установлено, что после однократного применения сыворотки наступает выздоровление от некробактериоэа у 85-90% животных.

Сыворотка не имеет аналогов в России и за рубежом, защищена патентом РФ на изобретение.

На опытно-промышленную партию утверждена нормативно-техническая документация по изготовлению и применению.

Вакцина была испытана в ряде неблагополучных по некробактериозу хозяйств и получила одобрение ветеринарных специалистов, поскольку создает стойкий иммунитет у животных на 6 месяцев.

Практические работники оценили вакцину положительно, но высказали пожелания снизить её вязкость, т.к. биопрепараты было трудно вводить шприцом, на месте инъекции образовывалась гранулемы, которые длительное время не рассасывались. Авторы усовершенствовали препарат, проведя дополнительную очистку и концентрирование антигена, в результате удалось снизить дозу вакцины в 10 раз. Теперь вместо подкожного применения её вводят животным внутрикожно при помощи безыгольного инъектора БИ-7М. Препарат инъецируют внутрикожно по 0,2 мл оленям однократно и по 0,4 мл крупному рогатому скоту, первый раз двукратно с интервалом в 4-6 недель, спустя 6 месяцев и все последующее время однократно Безыголный метод введения имеет ряд существенных преимуществ, Прежде всего, значительно повышается производительность труда: один специалист за час может вакцинировать 200-250 животных, при этом не требуется жесткой фиксации вакцинированных животных, сохраняется стерильность инъецированного препарата, практически исключена возможность перезаражения прививаемых животных, повышается экономичность способа.

Вакцина для внутрикожного метода введения расфасовывается во флаконы ёмкостью 20 см3, где в одном флаконе содержится 100 доз для северных оленей или 50 прививных доз для крупного рогатого скота В результате этого экономится тара и удешевляется процесс доставки препарата потребителям, что очень важно для регионов Крайнего Севера.

При освоении изготовления вакцины на ФГУП «Щёлковский биокомбинат» (Н.В. Мельник, Т.Н. Пышкина, Ю.Д Караваев и И Н. Семенова (ВИЭВ)) была разработана и внедрена промышленная технология препарата, В процессе работы была усовершенствована технология изготовления основных компонентов для составления питательных сред, а также предложена новая рецептура питательной среды для глубинного культивирования, обеспечивающая увеличение накопления антигенов для изготовления вакцины в 1,7-1,9 раза.

С 1997 - 2003 гг. вакцина прошла комиссионные испытания в неблагополучных по некробактериозу животноводческих хозяйствах в 25 регионах Российской Федерации.

Как правило, полученные результаты были положительными: вакцина предохраняла от заболевания около 98% привитых животных и обладала терапевтическим эффектом в 94-95% случаев.

При расчёте в Минсельхозе Республике Саха (Якутия) экономического эффекта, он составил 275 руб. 85 коп. на 1 руб. затрат. Внедрение вакцинопрофилактики в Республике Саха (Якутия) снизило заболеваемость на 95-97%, а летальность сократилась до 1,61%.

По распоряжению Департамента ветеринарии МСХ РФ « Щёлковский биокомбинат» изготовил 1 млн. оленьих доз, которые после проведения комиссионного государственного контроля были направлены в оленеводческие регионы.

При подведении итогов комиссионного испытания были получены только положительные отзывы, и было установлено, что вакцина является безвредным препаратом и вызывает иммунитет достаточной напряженности, предохраняющий северных оленей от заболевания некробактериозом.

Комиссионные испытания инактивированной эмульсин - вакцины и гипериммунной сыворотки показали, что эти препараты могут успешно использоваться в ветеринарной практике для борьбы с некробактериоэом крупного рогатого скота и северных оленей. Стоимость одной дозы вакцины значительно дешевле отечественных и зарубежных аналогов.

ФГУП « Щёлковский биокомбинат» освоил технологию препарата и приступил к его промышленному изготовлению. В настоящее время вакцина широко применяется во многих регионах РФ

При борьбе с некробактериозом сельскохозяйственных животных большое значение имеет своевременная и правильная постановка диагноза, который ставится на основании симптоматики болезни, бактериосколического исследования мазковотпечатков из пораженных тканей, результатов выделения культуры возбудителя и постановки биологической пробы, а также серологических методов.

Эти методы сравнительно давно вошли в ветеринарную практику и положительно зарекомендовали себя, как основные тесты, на которых базируется установление диагноза. Серологические методы служат для подтверждения диагноза, идентификации выделенных культур возбудителя, а также для определения иммуногенности вакцины. В ветеринарии для диагностики некробактериоза используются: реакция торможения гемагглютинации (РГА), диффузионной преципитации (РДП), иммуноферментный метод (ИФА), реакции иммунофлуорисценции (РИФ). Перечисленные методы требуют специального оборудования и могут осуществляться только в стационарных условиях.

В связи с вышеизложенным, мы разработали и активно используем экспресс-метод диагностики некробактериоза в реакции кровекапельной непрямой гемагглютинации на предметном стекле в условиях, приближённых к полевым, что особенно важно для работы в условиях тундры, при исследовании сыворотки крови от северных оленей, и отгонных пастбищ - у овец.

Техника постановки реакции довольно проста и доступна каждому ветеринарному специалисту. Специфический антиген на предметном стекле смешивается с исследуемой сывороткой в соотношении 1:1. Учёт реакции проводится визуально. У больных некробактериоэом животных, как правило, концентрация антител превышает разведения 1:32 и выше и оценивается в четыре креста. Промышленная технология изготовления антигена для КРНГА разработана и запатентована.

Таким образом, успех борьбы с некробактериозом животных зависит от своевременного и правильного проведения комплексной системы организационно-хозяйственных, ветеринарно-санитарных, профилактических и лечебных мероприятий по борьбе с некробактериозом крупного рогатого скота и северных оленей с доминирующим использованием специфических средств и методов диагностики, лечения и профилактики этой инфекционной болезни. Данная система разработана группой ученых, изучающих проблемы некробактериоза в России (М.И. Гулюкин, Ю.Д. Караваев, И.Н. Семенова, Н.В. Мельник, А.А. Плохова) и успешно внедряется в практику во многих регионах РФ. Указанная система была удостоена золотой медали и диплома 1 -и степени на 8-й Российской агропромышленной выставке «Золотая осень».

журнал "Ветеринарный врач" №01 2007